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昆明链霉菌凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,昆明链霉菌一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外昆明链霉菌光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
昆明链霉菌
HZC040Hu 人葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glucose Transporter 2 (GLUT2)
HZC041Hu 人过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Delta (PPARd)
HZC042Hu 人法尼酯X受体(FXR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Farnesoid X Receptor (FXR)
HZC044Hu 人肝X受体α(LXRα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Liver X Receptor Alpha (LXRa)
HZC054Hu 人S100钙结合蛋白P(S100P)ELISA试剂盒 ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein P (S100P)
HZC056Hu 人基质金属蛋白酶14(MMP14)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 14 (MMP14)
HZC058Hu 人白介素20(IL20)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 20 (IL20)
HZC060Hu 人血小板衍生生长因子受体α(PDGFRα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Receptor Alpha (PDGFRa)
HZC061Hu 人血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Receptor Beta (PDGFRb)
HZB924Hu 人尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4 (NOX4)
HZB982Hu 人内皮素受体B(ETRB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Endothelin Receptor B (ETRB)
HZB416Hu 人葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glucuronidase Beta (GUSb)
HZB650Hu 人主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP)
HZA662Hu 人白介素7(IL7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 7 (IL7)
HZB886Hu 人血管紧张素转化酶2(ACE2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)
HZC036Hu 人转铁蛋白(TRF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transferrin (TRF)