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细胞培养基的基本成分
液体培养基保存:液体培养基应于4℃冰箱避光保存,实验前放入37℃预热。未加血清液体培养基有效期为12 个月。液体培养基中的L-谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解。如果细胞生长不良,可以再添加适量L-谷氨酰胺。
干粉培养基保存:非洲绿猴肾细胞4℃冰箱避光保存,有效期36 个月。
血清:细胞培养液中添加的血清有牛血清、马血清、人血清等,其中牛血清是最常用的血清,分为胎牛血清和新生小牛血清。胎牛血清是从母牛破腹取出的胎牛中分离出的血清,价格昂贵。新生小牛血清是从刚出生的尚未哺乳的小牛中分离出来的血清,如厂家能做到这一点,新生小牛血清的质量与胎牛血清的质量相差不大。如小牛出生后已哺乳,从这种小牛中取出的血清中可能含有较多的生物活性物质,其质量明显不如前两种。非洲绿猴肾细胞
血清的质量,种类及使用的浓度都有可能影响细胞的生长,而不同批次的血清支持细胞生长的能力也不同,尤其是对克隆细胞的生长,某些批次血清可能含有毒性或抑制细胞生长的物质。因此,在购买大量血清之前,必须对血清支持细胞生长能力进行检测,然后再大量购买质量好的同一批号的血清,并注意以下几点:非洲绿猴肾细胞
(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ – 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1 个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
(2)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。非洲绿猴肾细胞
(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1 天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
(4)热灭活是指56℃, 30 分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中須規則搖晃均勻。此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活。除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。
(5)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。
(6)血清中的沉淀物
絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5 分钟去除,也可不用处理。
显微镜下“小黑点”:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”,常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。
hz-E11377 人甘露糖凝集素受体(MBLR)ELISA试剂盒 Human Mannma binding lectin receptor,MBLR ELISAkit
hz-E11378 人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒 Human plasmin/fibrinolysin,PL/Fbn ELISAkit
hz-E11379 人B细胞受体(BCR)ELISA试剂盒 Human B cell receptor,BCR ELISAkit
hz-E11380 人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA试剂盒 Human membrane IgM,mIgM ELISAkit
hz-E11381 人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISA试剂盒 Human membrane IgD,mIgD ELISAkit
hz-E11382 人杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)ELISA试剂盒 Human killer cell immnoglobulin-like receptor,KIR ELISAkit
hz-E11383 人杀伤细胞凝集素样受体(KLR)ELISA试剂盒 Human killer cell lectin-like receptor,KLR ELISAkit
hz-E11384 人活化蛋白C(APC) ELISA试剂盒 Human activated protein C,APC ELISAkit
hz-E11385 人蛋白C(Protein C)ELISA试剂盒 Human Protein C ELISAkit
hz-E11386 人血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒 Human platelet factor 3, PF3 ELISAkit
hz-E11387 人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA Human prothrombin fragment 1+2,F1+2 ELISAkit
hz-E11388 人甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)ELISA试剂盒 Human Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL ELISAkit
hz-E11389 人膜攻击复合物(MAC)ELISA试剂盒 Human membrane attack complex,MAC ELISAkit
hz-E11390 人优球蛋白(EL)ELISA试剂盒 Human EuglobulinLysis,EL ELISAkit
hz-E11391 人游离血红蛋白(f-Hb)ELISA试剂盒 Human free haemoglobin,f-Hb ELISAkit
hz-E11392 人鱼精蛋白1(PRM1)ELISA试剂盒 Human Protamine 1,PRM1 ELISAkit
hz-E11393 人一氧化碳血红蛋白(HbCO)ELISA试剂盒 Human carboxyhemoglobin,HbCO ELISAkit
hz-E11394 人血小板相关免疫球蛋白(PAIg)ELISA试剂盒 Human platelet-associated immunoglobulins,PAIg ELISAkit
hz-E11395 人血小板相关补体3(PAC3)ELISA试剂盒 Human platelet-associated Complement 3,PAC3 ELISAkit
hz-E11396 人血栓素A2(TX-A2)ELISA试剂盒 Human Thromboxane A2,TX-A2 ELISAkit
hz-E11397 人血红蛋白H(HbH)ELISA试剂盒 Human Hemoglobin H,HbH ELISAkit
hz-E11398 人血红蛋白C(HbC)ELISA试剂盒 Human Hemoglobin C,HbC ELISAkit
hz-E11399 人纤维蛋白(Fibrin)ELISA试剂盒 Human Fibrin ELISAkit
hz-E11400 人血纤肽/纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒 Human fibrinopeptide B,FPB ELISAkit
hz-E11401 人纤溶酶原激活剂(PLGA)ELISA试剂盒 Human plasminogen activator,PLGA ELISAkit
hz-E11402 人细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA试剂盒 Human Surface Membrane Immunoglobulin,SmIg ELISAkit
hz-E11403 人前白蛋白(PA)ELISA试剂盒 Human prealbumin,PA ELISAkit