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实验原理
大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)水平。用纯化的大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1),再与HRP 标记的大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)浓度。
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)ELISA试剂盒有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)ELISA试剂盒书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
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