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小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒的实验操作程序总结:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合ELISA试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测。
ELISA试剂盒的实验操作程序总结
1.准备试剂,样品和标准品
2.加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟
3.洗板5次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟
4.洗板5次,加入显色液A、B,37℃反应10分钟
5.加入终止液
6.15分钟之内度OD值
7.计算
小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒迎接中秋国庆双节公司ELISA试剂盒大促销:
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HZA886Hu 人过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPARg)
HZA820Hu 人凝血因子Ⅱ(F2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Coagulation Factor II (F2)
HZA819Hu 人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)
HZA887Hu 人丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP)
HZA861Hu 人补体成分3(C3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 3 (C3)
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