产品详情
大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)ELISA试剂盒仅供研究使用
检测范围1μg/L-60μg/L
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)含量。
实验原理
大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)水平。用纯化的大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7),再与HRP标记的大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60μg/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
30μg/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15μg/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5μg/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.75μg/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.从冷藏环境中取出应在室温大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)ELISA试剂盒平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)ELISA试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
xyB234Mu 小鼠杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Bactericidal/Permeability Increasing Protein
(BPI)
xyF839Mu 小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transient Receptor Potential
Cation Channel Subfamily V, Member 1 (TRPV1)
xyG343Mu 小鼠色胺酸羟化酶2(TPH2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tryptophan Hydroxylase 2 (TPH2)
xyG186Mu 小鼠Podocan蛋白(PODN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Podocan (PODN)
xyB232Mu 小鼠细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE)
xyB268Mu 小鼠苯酚磺基转移酶(PST)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Phenol Sulfotransferase (PST)
xyB874Mu 小鼠凝血因子Ⅶ(F7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Coagulation Factor VII (F7)
xyG191Mu 小鼠N-乙酰转移酶1(NAT1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for N-Acetyltransferase 1 (NAT1)
xyB928Mu 小鼠干扰素γ诱导单核因子(MIγ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Monokine Induced By Interferon Gamma (MIg)
xyF552Mu 小鼠赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2)
xyF551Mu 小鼠赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1)
xyC775Mu 小鼠络丝蛋白(RL)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Reelin (RL)
xyB547Mu 小鼠吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO)
xyE912Mu 小鼠沉默调节蛋白1(SIRT1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Sirtuin 1 (SIRT1)
xyC033Mu 小鼠热休克蛋白β8(HSPβ8)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 8 (HSPb8)
xyB647Mu 小鼠趋化因子C-C-基元受体7(CCR7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 7 (CCR7)
xyB289Mu 小鼠整合素α3(ITGα3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Integrin Alpha 3 (ITGa3)
xyC210Mu 小鼠组蛋白脱乙酰基酶2(HDAC2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Histone Deacetylase 2 (HDAC2)
xyD021Mu 小鼠重肽铁蛋白(FTH)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ferritin, Heavy Polypeptide (FTH)
xyB327Mu 小鼠生长关联蛋白43(GAP43)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Growth Associated Protein 43 (GAP43)
xyD152Mu 小鼠衰老关键蛋白2(FBLN2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fibulin 2 (FBLN2)
xyF752Mu 小鼠外周蛋白(PRPH)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Peripherin (PRPH)
xyD354Mu 小鼠Slit同源物1(Slit1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Slit Homolog 1 (Slit1)
xyA726Mu 小鼠转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transthyretin (TTR)
xyC890Mu 小鼠5羟色胺转运蛋白(SERT)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Serotonin Transporter (SERT)
xyB673Mu 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding
Protein 7 (IGFBP7)
xyE288Mu 小鼠含IQ基元GTP酶激活蛋白2(IQGAP2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for IQ Motif Containing GTPase Activating Protein 2