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小鼠葡萄糖激酶(GCK)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
小鼠葡萄糖激酶(GCK)检测试剂盒实验原理
应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠葡萄糖激酶(GCK)检测试剂盒相关如下:
Rat Bromodeoxyuridine,BrdU ELISAkit 大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)检测试剂盒96t/48t
Rat transforming growth factorsβ2,TGFβ2 ELISAkit 大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)检测试剂盒96t/48t
Rat cytochrome P450 2E1,CYP2E1 ELISAkit 大鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)检测试剂盒96t/48t
Rat α1-microglobulin,α1-MG ELISAkit 大鼠α1微球蛋白(α1-MG)检测试剂盒96t/48t
Rat monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISAkit 大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)检测试剂盒96t/48t
Rat peroxisome proliferators activator receptors 大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)检测试剂盒96t/48t
Rat calmodulin,CAM ELISAkit 大鼠钙调素(CAM)检测试剂盒96t/48t
Rat Apolipoprotein E,Apo-E ELISAkit 大鼠载脂蛋白E(Apo-E)检测试剂盒96t/48t
Rat omentin ELISAkit 大鼠网膜素(omentin)检测试剂盒96t/48t
Rat orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISAkit 大鼠孤腓肽(OFQ/N)检测试剂盒96t/48t
Rat Protein Phosphatase,PP ELISAkit 大鼠蛋白磷酸酶(PP)检测试剂盒96t/48t
Rat thioredoxin reductase,TrxR ELISAkit 大鼠硫氧还蛋白还原酶(TrxR)检测试剂盒96t/48t
Rat Thioredoxin,Trx ELISAkit 大鼠硫氧化还原蛋白(Trx)检测试剂盒96t/48t
Rat Collagenase Type II ELISAkit 大鼠胶原酶II(Collagenase II)检测试剂盒96t/48t
Rat Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 大鼠髓系细胞触发受体-1(TREM-1)检测试剂盒96t/48t
Rat Collagenase I ELISAkit 大鼠胶原酶I(Collagenase I)检测试剂盒96t/48t
Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISAkit 大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)检测试剂盒96t/48t
Rat phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK 大鼠磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)检测试剂盒96t/48t
Rat Cathepsin K,cath-K ELISAkit 大鼠组织蛋白酶K(cath-K)检测试剂盒96t/48t
小鼠葡萄糖激酶(GCK)检测试剂盒Rat Alternative macrophage activation-associated CC 大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)检测试剂盒96t/48t
Rat bone morphogenetic proteins,BMPs ELISAkit 大鼠骨形成蛋白(BMPs)检测试剂盒96t/48t
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