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小鼠弹性蛋白酶4(ELA4)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、小鼠弹性蛋白酶4(ELA4)检测试剂盒待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
小鼠弹性蛋白酶4(ELA4)检测试剂盒实验原理
应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠弹性蛋白酶4(ELA4)检测试剂盒相关如下:
Guinea Pig lipid peroxlde,LPO ELISAkit 豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)检测试剂盒96t/48t
Guinea Pig advanced glycation end products,AGEs ELISAkit 豚鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)检测试剂盒96t/48t
Guinea Pig Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISAkit 豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)检测试剂盒96t/48t
Guinea Pig monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISAkit 豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)检测试剂盒96t/48t
Procine hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISAkit 猪低氧诱导因子1α(HIF-1α)检测试剂盒96t/48t
Porcine sodium-glucose cotransporter 1,GSLT1 ELISAkit 猪钠-葡萄糖共转运载体1(GSLT1)检测试剂盒96t/48t
Porcine Relaxin,RLN ELISAkit 猪松弛肽/松弛素(RLN)检测试剂盒96t/48t
Porcine Influenza viruses A,FLU A ELISAkit 猪流感病毒A(FLU A)检测试剂盒96t/48t
Porcine Progesterone,PROG ELISAkit 猪孕激素/孕酮(PROG)检测试剂盒96t/48t
Porcine Interleukin 5,IL-5 ELISAkit 猪白介素-5(IL-5)检测试剂盒96t/48t
Porcine Laminin,LN ELISAkit 猪层连蛋白/板层素(LN)检测试剂盒96t/48t
Porcine Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISAkit 猪Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) 检测试剂盒96t/48t
Porcine soluble E-selectin,sE-selectin ELISAkit 猪可溶性E选择素(sE-selectin)检测试剂盒96t/48t
Porcine Interleukin 13,IL-13 ELISAkit 猪白介素13(IL-13)检测试剂盒96t/48t
Porcine Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISAkit 猪转化生长因子β2(TGF-β2)检测试剂盒96t/48t
Porcine E-Selectin ELISAkit 猪E选择素(E-Selectin/CD62E)检测试剂盒96t/48t
Porcine Melatonin,MT ELISAkit 猪褪黑素(MT)检测试剂盒96t/48t
Porcine Interleukin 12,IL-12/P40 ELISAkit 猪白介素12(IL-12/P40)检测试剂盒96t/48t
Porcine epidemic diarrhea virus antibody,PEDV ELISAkit 猪流行性腹泻病毒抗体(PEDV)检测试剂盒96t/48t
Porcine Transmissible Gastroenteritis virus antibody,TGEV ELISAkit 猪传染性胃肠炎病毒抗体(TGEV)检测试剂盒96t/48t
Porcine cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISAkit 猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)检测试剂盒96t/48t