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小鼠髓细胞触发受体1(TREM1)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件小鼠髓细胞触发受体1(TREM1)检测试剂盒相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
小鼠髓细胞触发受体1(TREM1)检测试剂盒实验原理
应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠髓细胞触发受体1(TREM1)检测试剂盒相关如下:
Porcine platelet-derived growth factor,PDGF ELISAkit 猪血小板衍生生长因子(PDGF)检测试剂盒96t/48t
Porcine oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISAkit 猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)检测试剂盒96t/48t
Porcine Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISAkit 猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)检测试剂盒96t/48t
Porcine Tissue factor,TF ELISAkit 猪组织因子(TF)检测试剂盒96t/48t
Porcine Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISAkit 猪白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)检测试剂盒96t/48t
Porcine Methemoglobin,MHB ELISAkit 猪高铁血红蛋白(MHB)检测试剂盒96t/48t
Porcine procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISAkit 猪Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)检测试剂盒96t/48t
Porcine low molecular weight heparin,LMWH ELISAkit 猪低分子肝素(LMWH)检测试剂盒96t/48t
Porcine listeriolysin O,LLO ELISAkit 猪单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)检测试剂盒96t/48t
Chicken very low density lipoprotein,VLDL ELISAkit 鸡极低密度脂蛋白(VLDL)检测试剂盒96t/48t
Chicken Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISAkit 鸡转化生长因子β2(TGF-β2)检测试剂盒96t/48t
Chicken Glucagon,GC ELISAkit 鸡胰高血糖素(GC)检测试剂盒96t/48t
Chicken Thyroxine,T4 ELISAkit 鸡甲状腺素(T4)检测试剂盒96t/48t
Chicken Tri-iodothyronine,T3 ELISAkit 鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)检测试剂盒96t/48t
Chicken anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISAkit 鸡抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)检测试剂盒96t/48t
Chicken Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISAkit 鸡核因子κB(NF-κB)检测试剂盒96t/48t
Chicken toxoplasma circulating antigen,TCA ELISAkit 鸡弓形虫循环抗原(TCA)检测试剂盒96t/48t
Chicken Parathyroid hormone,PTH ELISAkit 鸡甲状旁腺激素(PTH)检测试剂盒96t/48t
Hen egg Immunoglobulin of Yolk,IgY ELISAkit 鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)检测试剂盒96t/48t