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在小鼠氨酰tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取小鼠氨酰tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)检测试剂盒“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠氨酰tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠氨酰tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Neuroglobin (NGB) 大鼠脑红蛋白(NGB)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Aquaporin 4 (AQP4) 大鼠水通道蛋白4(AQP4)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Aquaporin 5 (AQP5) 大鼠水通道蛋白5(AQP5)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI) 大鼠组织因子通道抑制因子(TFPI)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1) 大鼠血红素氧合酶1(HO1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Kallikrein 3 (KLK3) 大鼠激肽释放酶3(KLK3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 大鼠甲胎蛋白(αFP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Myelin Basic Protein (MBP) 大鼠髓鞘碱性蛋白(MBP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Amyloid Beta Peptide 1-40 (Ab1-40) 大鼠淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 2 (HSPb2) 大鼠热休克蛋白β2(HSPβ2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Phospholipase A2, Lipoprotein Associated 大鼠脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial (NOS3) 大鼠内皮型一氧化氮合酶(NOS3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2) 大鼠诱导型一氧化氮合酶(NOS2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase Trafficker (NOSTRIN) 大鼠一氧化氮合酶运输因子(NOSTRIN)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Tumor Protein p53 (TP53) 大鼠肿瘤蛋白p53(TP53)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Substance P (SP) 大鼠P物质(SP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI) 大鼠α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)检测试剂盒96t/48t