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人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E12074 小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒 Mouse Ceruloplasmin,CP/CER ELISAkit
hz-E12075 小鼠p53(p53)ELISA试剂盒 Mouse p53/tumor protein,p53/TP53 ELISAkit
hz-E12076 小鼠环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒 Mouse Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISAkit
hz-E12077 小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒 Mouse nitric oxide synthase,NOS ELISAkit
hz-E12078 小鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 Mouse inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISAkit
hz-E12079 小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 Mouse Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISAkit
hz-E12080 小鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒 Mouse Histamine,HIS ELISAkit
hz-E12081 小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒 Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISAkit
hz-E12082 小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒 Mouse Heat Shock Protein 90,Hsp-90 ELISAkit
hz-E12083 小鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒 Mouse Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISAkit
hz-E12084 小鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒 Mouse adiponectin,ADP ELISAkit
hz-E12085 小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)ELISA试剂盒 Mouse Heat Shock Protein 40,Hsp-40 ELISAkit
hz-E12086 小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒 Mouse amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISAkit
hz-E12087 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒 Mouse interleukin 8,IL-8 ELISAkit
hz-E12088 小鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒 Mouse Cyclin-D3 ELISAkit
hz-E12089 小鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒 Mouse Cyclin-D2 ELISAkit
hz-E12090 小鼠雌激素(E)ELISA试剂盒 Mouse estrogen,E ELISAkit
hz-E12091 小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒 Mouse Cyclin-D1 ELISAkit
hz-E12092 小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 Mouse myelin basic protein,MBP ELISAkit
hz-E12093 小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒 Mouse transforming growth factor α,TGF-α ELISAkit