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人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E10047 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒 Human Neural cell adhesion molecule ligand 1,NCAM-L1 ELISAkit
hz-E10048 人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒 Human Cobra venom neuronal protective factor,CVNPF ELISAkit
hz-E10049 人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA试剂盒 Human soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor,sTNFαR ELISAkit
hz-E10050 人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA试剂盒 Human soluble cytokine receptor,sCKR ELISAkit
hz-E10051 人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)ELISA试剂盒 Human soluble Factor-related Apoptosis ligand,sFASL/Apo-1 ELISAkit
hz-E10052 人细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA试剂盒 Human inhibitor of apoptosis,IAP ELISAkit
hz-E10053 人集落刺激因子(CSF)ELISA试剂盒 Human colony-stimulating factor,CSF ELISAkit
hz-E10054 人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA试剂盒 Human monocyte interferon gamma inducing factor,MIGF ELISAkit
hz-E10055 人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)ELISA试剂盒 Human Interferon inducible T-cell Chemoattractant,I-TAC ELISAkit
hz-E10056 人CD14分子(CDl4)ELISA试剂盒 Human cluster Of differentiation,CDl4 ELISAkit
hz-E10057 人凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒 Human apoptosis inducing factor,AIF ELISAkit
hz-E10058 人白细胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA试剂盒 Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 ELISAkit
hz-E10059 人CD4分子(CD4)ELISA试剂盒 Human cluster Of differentiation,CD4 ELISAkit
hz-E10060 人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒 Human Placenta Cadherin,P-cad ELISAkit
hz-E10061 人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒 Human Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISAkit
hz-E10062 人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒 Human Platelet-Derived Growth Factor-BB,PDGF-BB ELISAkit
hz-E10063 人CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒 Human CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISAkit
hz-E10064 人CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒 Human CXC-chemokine receptor 3,CXCR3 ELISAkit
hz-E10065 人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒 Human interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISAkit
hz-E10066 人基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒 Human Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISAkit
hz-E10067 人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒 Human lymphotactin,Lptn/LTN ELISAkit
hz-E10068 人α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 Human Interferon α,IFN-α ELISAkit
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