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人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZA262Hu 人转铁蛋白受体2(TFR2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transferrin Receptor 2 (TFR2)
AEA275Hu 人抗SSB/La抗体(Anti-La)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Anti-SSB/La Antibody (Anti-La)
HZA277Hu 人间隙连接蛋白43(CX43)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Connexin 43 (CX43)
HZA278Hu 人踝蛋白(TLN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Talin (TLN)
HZA281Hu 人B-细胞激活因子受体(BAFFR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for B-Cell Activation Factor Receptor (BAFFR)
HZA282Hu 人组蛋白H2A(H2A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Histone H2A (H2A)
AEA288Hu 人抗双链DNA抗体(Anti-dsDNA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Anti-Double Stranded DNA Antibody (Anti-dsDNA)
HZA306Hu 人组织蛋白酶L(CTSL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cathepsin L (CTSL)
HZA310Hu 人载脂蛋白H(APOH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Apolipoprotein H (APOH)
HZA329Hu 人多功能肽酶2(LMP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)
HZA545Hu 人免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Immunoglobulin E (IgE)
HZA355Hu 人甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thyroglobulin (TG)
HZA356Hu 人组蛋白H2B(H2B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Histone H2B (H2B)
HZA362Hu 人尾加压素2(UST2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Urotensin 2 (UST2)
HZA363Hu 人血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1)
HZA365Hu 人和肽素(CPP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Copeptin (CPP)
HZA402Hu 人基质金属蛋白酶12(MMP12)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)
HZA403Hu 人粘蛋白17(MUC17)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mucin 17 (MUC17)
HZA408Hu 人激肽释放酶9(KLK9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kallikrein 9 (KLK9)
HZA410Hu 人GATA结合蛋白3(GATA3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for GATA Binding Protein 3 (GATA3)