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人α-骨胶原交联(αCTx)ELISA试剂盒的原理
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
人α-骨胶原交联(αCTx)ELISA试剂盒在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。前文(2.2)已述,ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)酶联物(结合物)及标本的稀释液;
(6)洗涤液;人α-骨胶原交联(αCTx)ELISA试剂盒
(7)酶反应终止液。
实验前的准备工作那是相当的重要。要用到的100ul中枪头、1000ul大枪头、1.5ml EP管事先灭菌好是必须的;多次使用的酶标板框洗净烘干;
3.备齐用品:100ul加样枪及枪头,1000ul加样枪及枪头,100ml量筒(洗净并双蒸水冲洗),500ml量杯(洗净并双蒸水冲洗,实验室没有更小的了),双蒸水100ml(稀释洗涤液用),吹气球,吸水纸(定性滤纸),试管架,避光湿盒,酶标板框,定时器,胶带,剪刀,弃物盒及废液缸;
4.准备实验时进入实验室即打开37度恒温箱让它开始升温,不然等到需要用时再打开,你急它不急,它升温需要时间,可能已经过了要温育的时间它才达到37度;样品和试剂盒在室温下平衡30分钟以上;
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