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人氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZA135Ra 大鼠血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thrombopoietin (TPO)
HZA134Ra 大鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Beta (TNFb)
HZA130Ra 大鼠组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4)
HZA129Ra 大鼠组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3)
HZA128Ra 大鼠组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2)
HZA126Ra 大鼠内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2)
HZA125Ra 大鼠免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1)
HZA122Ra 大鼠基质细胞衍生因子1(SDF1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Stromal Cell Derived Factor 1 (SDF1)
HZA119Ra 大鼠CD40配体(CD40L)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 40 Ligand (CD40L)
HZA116Ra 大鼠调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Regulated On Activation In Normal T-Cell Expressed And Secreted (RANTES)
HZA114Ra 大鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Placenta Growth Factor (PLGF)
HZA110Ra 大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Oncostatin M (OSM)
HZA109Ra 大鼠肌肌酸激酶(CKM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM)
HZA108Ra 大鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Osteoprotegerin (OPG)
HZA104Ra 大鼠胆囊收缩素A受体(CCKAR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR)
HZA103Ra 大鼠基质金属蛋白酶8(MMP8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8)
HZA102Ra 大鼠基质金属蛋白酶7(MMP7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7)
HZA101Ra 大鼠基质金属蛋白酶3(MMP3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)
HZA100Ra 大鼠基质金属蛋白酶2(MMP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)
HZA099Ra 大鼠基质金属蛋白酶13(MMP13)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)
HZA098Ra 大鼠基质金属蛋白酶10(MMP10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 10 (MMP10)
HZA097Ra 大鼠基质金属蛋白酶1(MMP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)