人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题：

1. 吸取样品时，加样枪吸头不应黏附多余的液体；加样时不可90度向孔中滴加液体，这样会导致液体残留在吸头上，加样不准确！

2. 不要将吸头伸入孔中，一方面若接触孔底可能压弯吸头，另一方面可能会将孔中的液体吹起来，加样不准确！

正确的加样方法应为45度，吸头贴着孔壁加入，应注意：

1. 角度太小，会使液体残留在孔壁上，导致加样不准确！

2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处！

在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中，如以TMB为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以OPD为底物，则试剂盒提供OPD片剂或粉剂，临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15～30分钟。从理论上说，37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全，尽管在最初的10分钟内，绝大部份催化反应即可完成。因此，为使弱阳性样本孔能有充分的显色，建议在37℃下反应25～30分钟后，终止反应比色测定。

此外，人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前，最好是先检查一下底物溶液的有效性，即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中，观察是否有显色出现，如有，则说明底物已变质。以OPD为底物，配好后应为无色，否则就不能使用。以TMB为底物，整个显色反应过程无需避光，而以OPD为底物，则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后，加入酸终止反应，振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。

1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中，检验同一样本达20次以上时，就会发现这组数据（指测定结果的吸光值）分布在均值两侧，大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标，以出现的频率为纵坐标作图，就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1，钟顶处为均值，其他值以均值为中心对称分布，人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率，常用样本的均数（X）和标准差（SD）来表示，其计算方法如下： 　　 　　均值、标准差和概率的关系如下： 　　X±1SD，概率0.68　　　　X±2SD，概率0.95　　　　X±3SD，概率0.99 换言之，当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据，其中靠近均值（X）的±1SD范围内的数据，占该组数据的68%，在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%，在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时，将有95%的数据可能合格。

优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条

件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。

本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试

剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，严格遵照规定操作，必能得出

准确的结果。

人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒相关产品系列表：

HZA424Ra 大鼠八聚体结合转录因子4(OCT4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Octamer Binding Transcription Factor 4 (OCT4)

HZB241Ra 大鼠Kruppel样因子4(KLF4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kruppel Like Factor 4, Gut (KLF4)

HZB290Ra 大鼠V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene Homolog (MYC)

HZB823Ra 大鼠补体成分9(C9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 9 (C9)

HZA389Ra 大鼠补体成分4a(C4a)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 4a (C4a)

HZB622Ra 大鼠表面活性物质关联蛋白B(SPB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Surfactant Associated Protein B (SPB)

HZB818Ra 大鼠血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 (VEGFR1)

HZA411Ra 大鼠钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)

HZB045Ra 大鼠蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protein Kinase C Beta 1 (PKCb1)

HZA243Ra 大鼠对氧磷酶1(PON1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1)

HZC489Ra 大鼠膜铁转运蛋白(FPN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ferroportin (FPN)

HZB706Ra 大鼠脂质运载蛋白1(LCN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lipocalin 1 (LCN1)

HZA622Ra 大鼠谷胱甘肽S转移酶θ1(GSTθ1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutathione S Transferase Theta 1 (GSTt1)

HZC896Ra 大鼠皮敌菌素(DCD)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dermcidin (DCD)

HZA350Ra 大鼠Ⅰ型胶原α1(COL1α1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 1 (COL1a1)

HZB983Ra 大鼠微管关联蛋白τ(MAPτ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Microtubule Associated Protein Tau (MAPt)

HZC470Ra 大鼠脂肪酸合酶(FASN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fatty Acid Synthase (FASN)

HZB302Ra 大鼠野鼠色基因相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Agouti Related Protein (AGRP)

HZA967Ra 大鼠激肽释放酶1(KLK1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kallikrein 1 (KLK1)

HZB760Ra 大鼠再生胰岛衍生蛋白1α(REG1α)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha (REG1a)