人前病毒整合位点1(Pim1)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题：

1. 吸取样品时，加样枪吸头不应黏附多余的液体；加样时不可90度向孔中滴加液体，这样会导致液体残留在吸头上，加样不准确！

2. 不要将吸头伸入孔中，一方面若接触孔底可能压弯吸头，另一方面可能会将孔中的液体吹起来，加样不准确！

正确的加样方法应为45度，吸头贴着孔壁加入，应注意：

1. 角度太小，会使液体残留在孔壁上，导致加样不准确！

2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处！

在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中，如以TMB为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以OPD为底物，则试剂盒提供OPD片剂或粉剂，临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15～30分钟。从理论上说，37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全，尽管在最初的10分钟内，人前病毒整合位点1(Pim1)ELISA试剂盒绝大部份催化反应即可完成。因此，为使弱阳性样本孔能有充分的显色，建议在37℃下反应25～30分钟后，终止反应比色测定。

此外，在加入底物开始显色反应前，最好是先检查一下底物溶液的有效性，即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中，观察是否有显色出现，如有，则说明底物已变质。以OPD为底物，配好后应为无色，否则就不能使用。以TMB为底物，整个显色反应过程无需避光，而以OPD为底物，则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后，加入酸终止反应，振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。

1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中，检验同一样本达20次以上时，就会发现这组数据（指测定结果的吸光值）分布在均值两侧，大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标，以出现的频率为纵坐标作图，就可绘出一个呈钟形的曲线图。人前病毒整合位点1(Pim1)ELISA试剂盒如图5-1，钟顶处为均值，其他值以均值为中心对称分布，这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率，常用样本的均数（X）和标准差（SD）来表示，其计算方法如下： 　　 　　均值、标准差和概率的关系如下： 　　X±1SD，概率0.68　　　　X±2SD，概率0.95　　　　X±3SD，概率0.99 换言之，当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据，其中靠近均值（X）的±1SD范围内的数据，占该组数据的68%，在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%，在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时，将有95%的数据可能合格。

优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条

件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。

本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试

剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，严格遵照规定操作，必能得出

准确的结果。

人前病毒整合位点1(Pim1)ELISA试剂盒相关产品系列表：

HZA698Mu 小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF)

HZA002Mu 小鼠白细胞激活黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM)

HZA007Mu 小鼠血管生长素(ANG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Angiogenin (ANG)

HZA008Mu 小鼠血管生成素1(ANGPT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Angiopoietin 1 (ANGPT1)

HZA009Mu 小鼠血管生成素2(ANGPT2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Angiopoietin 2 (ANGPT2)

HZA112Mu 小鼠β细胞素(βTC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Betacellulin (bTC)

HZB574Hu 人髓样前体细胞抑制因子1(MPIF1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1 (MPIF1)

HZA021Mu 小鼠睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF)

HZA024Mu 小鼠内分泌腺来源血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)

HZA032Mu 小鼠酸性成纤维细胞生长因子(FGF1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1)

HZA034Mu 小鼠成纤维细胞生长因子4(FGF4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4)

HZA035Mu 小鼠成纤维细胞生长因子6(FGF6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 6 (FGF6)

HZA036Mu 小鼠成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9)

HZA041Mu 小鼠中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neutrophil Activating Protein 3 (NAP3)

HZA043Mu 小鼠胶质细胞系来源神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor (GDNF)

HZA044Mu 小鼠生长激素(GH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Growth Hormone (GH)

HZA047Mu 小鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF)

HZA055Mu 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)

HZA146Mu 小鼠血管内皮生长因子D(VEGFD)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD)

HZA058Mu 小鼠白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B)

HZA145Mu 小鼠血管内皮生长因子C(VEGFC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor C (VEGFC)

HZA144Mu 小鼠血管内皮生长因子B(VEGFB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor B (VEGFB)

HZA141Mu 小鼠尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(uPAR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase Receptor (uPAR)