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人流行性腮腺炎(EP)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,人流行性腮腺炎(EP)ELISA试剂盒绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)人流行性腮腺炎(EP)ELISA试剂盒分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人流行性腮腺炎(EP)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZB232Mu 小鼠细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE)
HZB268Mu 小鼠苯酚磺基转移酶(PST)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Phenol Sulfotransferase (PST)
HZB874Mu 小鼠凝血因子Ⅶ(F7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Coagulation Factor VII (F7)
HZG191Mu 小鼠N-乙酰转移酶1(NAT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for N-Acetyltransferase 1 (NAT1)
HZB928Mu 小鼠干扰素γ诱导单核因子(MIγ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Monokine Induced By Interferon Gamma (MIg)
HZF552Mu 小鼠赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2)
HZF551Mu 小鼠赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1)
HZC775Mu 小鼠络丝蛋白(RL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Reelin (RL)
HZB547Mu 小鼠吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO)
HZE912Mu 小鼠沉默调节蛋白1(SIRT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sirtuin 1 (SIRT1)
HZC033Mu 小鼠热休克蛋白β8(HSPβ8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 8 (HSPb8)
HZB647Mu 小鼠趋化因子C-C-基元受体7(CCR7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 7 (CCR7)
HZB289Mu 小鼠整合素α3(ITGα3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Integrin Alpha 3 (ITGa3)
HZC210Mu 小鼠组蛋白脱乙酰基酶2(HDAC2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Histone Deacetylase 2 (HDAC2)
HZD021Mu 小鼠重肽铁蛋白(FTH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ferritin, Heavy Polypeptide (FTH)
HZB327Mu 小鼠生长关联蛋白43(GAP43)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Growth Associated Protein 43 (GAP43)
HZD152Mu 小鼠衰老关键蛋白2(FBLN2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibulin 2 (FBLN2)
HZF752Mu 小鼠外周蛋白(PRPH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peripherin (PRPH)
HZD354Mu 小鼠Slit同源物1(Slit1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Slit Homolog 1 (Slit1)
HZC418Mu 小鼠过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Catalase (CAT)
HZA475Mu 小鼠维生素D受体(VDR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Vitamin D Receptor (VDR)
HZC641Mu 小鼠微粒体甘油三酸酯转运蛋白(MTTP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Microsomal Triglyceride Transfer Protein (MTTP)
HZE040Mu 小鼠围脂滴蛋白4(PLIN4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Perilipin 4 (PLIN4)