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人包虫抗体IgGELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,人包虫抗体IgGELISA试剂盒绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)人包虫抗体IgGELISA试剂盒分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人包虫抗体IgGELISA试剂盒相关产品系列表:
HZC068Mu 小鼠VEGF共调节趋化因子1(VCC1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1)
HZF323Mu 小鼠羧肽酶N1(CPN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Carboxypeptidase N1 (CPN1)
HZC616Mu 小鼠甲基CpG结合蛋白2(MECP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Methyl CpG Binding Protein 2 (MECP2)
HZD757Mu 小鼠谷光甘肽合成酶(GSS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutathione Synthetase (GSS)
HZL644Mu 小鼠Egl Nine同源物1(EGLN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Egl Nine Homolog 1 (EGLN1)
HZG529Mu 小鼠溶血卵磷脂酰基转移酶1(LPCAT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 1 (LPCAT1)
HZG530Mu 小鼠溶血卵磷脂酰基转移酶2(LPCAT2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 2 (LPCAT2)
HZG531Mu 小鼠溶血卵磷脂酰基转移酶3(LPCAT3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 3 (LPCAT3)
HZG532Mu 小鼠溶血卵磷脂酰基转移酶4(LPCAT4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 4 (LPCAT4)
HZB453Mu 小鼠胰脂肪酶(PL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lipase, Pancreatic (PL)
HZC924Mu 小鼠肾上腺素能受体β1(ADRβ1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adrenergic Receptor Beta 1 (ADRb1)
HZD978Mu 小鼠肾上腺素能受体β2(ADRβ2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adrenergic Receptor Beta 2 (ADRb2)
HZE839Mu 小鼠醛脱氢酶9家族成员A1(ALDH9A1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase 9 Family, Member A1 (ALDH9A1)
HZC903Mu 小鼠碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅱ(DIO2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Deiodinase, Iodothyronine, Type II (DIO2)
HZD979Mu 小鼠肾上腺素能受体β3(ADRβ3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adrenergic Receptor Beta 3 (ADRb3)
HZK305Mu 小鼠RAS癌基因家族成员RAB5A(RAB5A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for RAB5A, Member RAS Oncogene Family (RAB5A)
HZB109Mu 小鼠肌细胞生成素(MYOG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myogenin (MYOG)
HZF541Mu 小鼠白细胞衍生趋化因子2(LECT2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Leukocyte Cell Derived Chemotaxin 2 (LECT2)
HZA659Mu 小鼠谷胱甘肽S转移酶α4(GSTα4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 4 (GSTa4)
HZH775Mu 小鼠中间α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H5 (ITIH5)
HZM216Mu 小鼠剪接因子3B亚基3(SF3B3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Splicing Factor 3B Subunit 3 (SF3B3)
HZP553Mu 小鼠无翅型MMTV整合位点家族成员10B(WNT10B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 10B (WNT10B)