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人流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,人流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)ELISA试剂盒绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)人流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)ELISA试剂盒分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZC564Mu 小鼠天冬酰胺內肽酶(LGMN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Legumain (LGMN)
HZC828Mu 小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tripeptidyl Peptidase I (TPP1)
HZA348Mu 小鼠组织蛋白酶A(CTSA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cathepsin A (CTSA)
HZC123Mu 小鼠Smad同源物3(Smad3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3 (Smad3)
HZC972Mu 小鼠转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβR2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Receptor II (TGFbR2)
HZL437Mu 小鼠δ样蛋白1同源物(δLK1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Delta Like 1 Homolog (dLK1)
CEG291Mu 小鼠鸟苷酸环化酶激活因子2A(GUCA2A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Guanylate Cyclase Activator 2A (GUCA2A)
HZD243Mu 小鼠周期素依赖性激酶8(CDK8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase 8 (CDK8)
HZB008Mu 小鼠低密度脂蛋白受体(LDLR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor (LDLR)
HZB693Mu 小鼠脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 4, Adipocyte (FABP4)
HZC043Mu 小鼠维甲酸X受体α(RXRα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Retinoid X Receptor Alpha (RXRa)
HZK042Mu 小鼠肌肽合酶1(CARNS1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Carnosine Synthase 1 (CARNS1)
HZB521Mu 小鼠黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mucosal Addressin Cell Adhesion Molecule 1 (MAdCAM1)
HZD104Mu 小鼠低密度脂蛋白受体衔接蛋白1(LDLRAP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Adaptor Protein 1 (LDLRAP1)
HZA773Mu 小鼠糖皮质激素受体β(GRβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Beta (GRb)
HZA774Mu 小鼠糖皮质激素受体α(GRα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Alpha (GRa)
HZE675Mu 小鼠再生胰岛衍生蛋白3α(REG3α)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Alpha (REG3a)
HZG697Mu 小鼠G蛋白偶联受体120(GPR120)ELISA试剂盒 ELISA Kit for G Protein Coupled Receptor 120 (GPR120)
HZC216Mu 小鼠E1A结合蛋白P300(EP300)ELISA试剂盒 ELISA Kit for E1A Binding Protein P300 (EP300)
HZG817Mu 小鼠多胺氧化酶(PAOX)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Polyamine Oxidase (PAOX)
HZC187Mu 小鼠V-Erb B2红白血病病毒癌基因同源物3(ErbB3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for V-Erb B2 Erythroblastic Leukemia Viral Oncogene Homolog 3 (ErbB3)
HZA713Mu 小鼠CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta (CEBPb)
HZC759Mu 小鼠静止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1)
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