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人白喉抗体(Diphtheria Ab)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,人白喉抗体(Diphtheria Ab)ELISA试剂盒绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)人白喉抗体(Diphtheria Ab)ELISA试剂盒分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人白喉抗体(Diphtheria Ab)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZA569Rb 兔P选择素(SELP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Selectin, Platelet (SELP)
HZA568Rb 兔S100钙结合蛋白A11(S100A11)ELISA试剂盒 ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A11 (S100A11)
HZA567Rb 兔S100钙结合蛋白B(S100B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein B (S100B)
HZA056Rb 兔白介素10(IL10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10)
HZA563Rb 兔白介素1β(IL1β)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b)
HZA077Rb 兔白介素4(IL4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4)
HZA079Rb 兔白介素6(IL6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6)
HZA080Rb 兔白介素8(IL8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8)
HZA087Rb 兔单核细胞趋化蛋白1(MCP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 1 (MCP1)
HZA049Rb 兔干扰素γ(IFNγ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg)
HZA047Rb 兔肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF)
HZA553Rb 兔基质金属蛋白酶9(MMP9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)
HZA552Rb 兔组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1)
HZA551Rb 兔碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2)
HZA547Rb 兔血管细胞粘附分子1(VCAM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM1)
CEA544Rb 兔免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Immunoglobulin G (IgG)
HZA543Rb 兔免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Immunoglobulin M (IgM)
CEA482Rb 兔内皮素1(EDN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1)
HZA084Rb 兔瘦素(LEP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Leptin (LEP)
HZA548Rb 兔细胞间粘附分子1(ICAM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1)
HZA534Rb 兔细胞间粘附分子2(ICAM2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 2 (ICAM2)
HZA532Rb 兔纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI1)
HZA531Rb 兔纤溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Plasminogen Activator Inhibitor 2 (PAI2)