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RPMI 1640是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,RPMI 1640因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。
首先,我们要从众多培养基成分及影响的环境因素中筛选出具有主效应的因子。这时,通常采用筛选试验。主要有全因子因析设计和Plackett-Burman设计。两种筛选试验,各有千秋,但都能以最少的试验次数筛选出主效应因子。其中全因子设计能够表现出因子的三级以上交互作用,而Plackett-Burman设计由于是两水平设计,所以交互作用只在二级交互作用。另外还有部分因子因析设计。
筛选到了主效应因子,我们就可以开始进行下一步优化试验。此时,主要有中心复合设计和Box-Behnken设计。
中心组合设计是一种国际上较为常用的响应面法,RPMI 1640是一种5水平的实验设计法。采用该法能够在有限的实验次数下,对影响生物过程的因子及其交互作用进行评价,而且还能对各因子进行优化,以获得影响过程的最佳条件。
Box- Behnken设计是另一种国际上较为常用的响应面法,是一种3水平的实验设计法。同样具有响应面法的优点。近年来利用该法进行生物过程优化的文献比用中心组合设计法的明显地少。
斜面培养基
葡萄糖8g,酵母粉10g碳酸钙5g琼脂15~20g水1000mLpH5.5,分装试管。0.IMPa灭菌20min。95%酒精(食用级)40mL。摆斜面,
液体增殖培养基
葡萄糖10g 酵母粉10g pH5.5水1000mL灭菌后加入酒精(食用级)40mL 0.1MPa灭菌20min。
醋酸菌种的制备
扩大培养过程:安瓿管,液体试管1.液体试管2,100mL三角瓶,500mL三角瓶,1000mL三角瓶,种子罐。
安瓿管开启:酒精棉球擦抹三次,用重器撞击,打开,注入0.5mL无菌水,将菌球溶解,全部注入装有10mL液体培养基的18×180试管1内,30℃培养72h,每2h摇动—次
菌体生长:培养基变混浊后,颜色变浅,RPMI 1640对光观察摇动时有云雾状金属光泽。每只装有10mL液体培养基的试管2接入lmL或0.5mL菌液,30℃培养48h,每2h摇动—次。
xy1579麦康凯琼脂2号 250g用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法)
xy1580麦康凯琼脂(不含盐)250g用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法)
xy1582血琼脂基础2号250g供分离营养要求非常高的致病菌用,后加血液制成血平板
xy1583CIN-1培养基基础250g用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌
xy1584无淀粉改良罗氏培养基250g用于结核杆菌分离培养
xy1585改良Skirrow氏琼脂基础250g用于空肠弯曲菌的分离培养
2010年中国药典版
xy1701沙氏琼脂培养基(SDA)250g用于医药工业洁净室(区)沉降菌的测试(GB/T 16294—2010)
xy1702抗生素检定培养基1号(高pH)250g用于链霉素、卡那霉素、庆大霉素、红霉素等效价检定
xy1703抗生素检定培养基1号(低pH)250g用于磺苄青霉素效价检定
xy1704抗生素检定培养基2号(高pH)250g用于林可霉素,克林霉素等效价测定
xy1705抗生素检定培养基2号(低pH)250g用于四环素,土霉素等效价测定
xy1706抗生素检定培养基3号250g用于藤黄八叠球菌菌悬液制备
xy17070.5%葡萄糖肉汤培养基250g用于硫酸链霉素等抗生素的无菌检验
xy1708抗生素检定培养基4号250g用于两性霉素B等的效价测定
xy1709抗生素检定培养基7号250g用于头孢噻肟钠灯的效价测定
xy1710抗生素检定培养基8号250g用于去甲万古霉素等的效价测定
xy1711卵黄氯化钠琼脂培养基250g用于药品,生物制品金黄色葡萄球菌选择性分离
xy1712抗生素检定培养基5号250g用于两性霉素B检定菌种培养
xy1713支原体培养基基础(含精氨酸)250g用于培养支原体的基础培养基
xy1714PPLO肉汤250g用于培养支原体的基础培养基
xy1715硫乙醇酸盐流体培养基250g用于药品,生物制品无菌试验,培养基,厌氧菌
xy1716改良马丁培养基250g用于药品及生物制品霉菌无菌检验
xy1717改良马丁琼脂培养基250g用于药品及生物制品霉菌无菌检验
xy1718玫瑰红钠琼脂培养基250g用于霉菌、酵母菌计数
xy1719酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)250g用于测定酵母菌总数
xy1720乳糖发酵培养基250g用于大肠菌群发酵试验
xy1721麦康凯琼脂250g用于肠道致病菌的选择性分离、培养