温育是小鼠成纤维细胞生长因子19(FGF19)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠成纤维细胞生长因子19(FGF19)检测试剂盒作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。

温育这一步是临床小鼠成纤维细胞生长因子19(FGF19)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：

（1）要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，小鼠成纤维细胞生长因子19(FGF19)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。

（2）温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37℃下1小时，另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床小鼠成纤维细胞生长因子19(FGF19)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。

（3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深，产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规 ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。

总而言之，在临床小鼠成纤维细胞生长因子19(FGF19)检测试剂盒测定中，要保证好的测定效果，可采用下述简单办法来确保温育条件，即尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。

hzC061Hu 人血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor ReHZptor Beta (PDGFRb) 

hzB924Hu 人尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4 (NOX4) 

hzB982Hu 人内皮素受体B(ETRB)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Endothelin ReHZptor B (ETRB) 

hzB416Hu 人葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Glucuronidase Beta (GUSb) 

hzB650Hu 人主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP) 

hzA662Hu 人白介素7(IL7)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Interleukin 7 (IL7) 

hzB886Hu 人血管紧张素转化酶2(AHZ2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Angiotensin I Converting Enzyme 2 (AHZ2) 

hzC036Hu 人转铁蛋白(TRF)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Transferrin (TRF) 

hzA303Hu 人半乳糖凝集素3(GAL3)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3) 

hzA131Hu 人转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta InduHZd Protein (TGFbI) 

hzC047Hu 人Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ki-67 Protein (Ki67P) 

hzC130Hu 人头蛋白(NOG)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Noggin (NOG) 

hzA162Hu 人嗅素4(OLFM4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Olfactomedin 4 (OLFM4) 

hzB271Hu 人IgG-Fc片段低亲和力受体Ⅲb(FcγR3B)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIb ReHZptor (FcgR3B) 

hzC864Hu 人硬骨素(SOST)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Sclerostin (SOST) 

hzB978Hu 人补体因子I(CFI)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Complement Factor I (CFI) 

hzD024Hu 人心肌型兰尼定受体2(RYR2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ryanodine ReHZptor 2, Cardiac (RYR2) 

hzA203Hu 人前动力蛋白受体1(PKR1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Prokineticin ReHZptor 1 (PKR1) 

hzA307Hu 人半乳糖凝集素7(GAL7)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Galectin 7 (GAL7) 

hzA309Hu 人半乳糖凝集素9(GAL9)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Galectin 9 (GAL9) 

hzA115Hu 人前动力蛋白2(PK2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Prokineticin 2 (PK2) 

hzA117Hu 人胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Superoxide Dismutase 3, ExtraHZllular (SOD3) 

hzA153Hu 人甲胎蛋白(αFP)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 

hzC045Hu 人抗存活素抗体(Anti-Surv)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Anti-Survivin Antibody (Anti-Surv) 

hzA242Hu 人摄食抑制因子1(NES1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Nesfatin 1 (NES1)