人乳腺细胞操作前打开紫外灯30-60分钟，这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果，但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置，可以与紫外灯一起打开，人乳腺细胞此时不需要抽滤开的过大就可以。（所谓的抽滤装置就是就是那个风机，就是吹风超净工作台，不是过滤培养液的）!

细胞传代培养（消化法）具体操作：

一：传代前准备；

1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液：人乳腺细胞取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞最好，最佳消化温度是37℃。

2. 人乳腺细胞 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

三：吹打分散细胞；

1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四：分装稀释细胞；

1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。

五：继续培养；

用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。人乳腺细胞传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一个＋，占50％为＋＋，占75％时为＋＋＋。  

XY0102 胸膜细胞瘤) SMC-1细胞

XY0103 新生牛眼晶体上皮细胞,NBLE细胞

XY0104 新生牛眼Tenon＇s囊成纤维细胞,NBTF细胞

XY0105 新鞘氨醇单胞菌

XY0106 谢氏丙酸杆菌

XY0107 小细胞肺癌细胞,NCI-H446 [H446]细胞

XY0108 小鼠自发高乳腺癌细胞,TA2细胞

XY0109 小鼠子宫颈癌细胞,U14细胞

XY0110 小鼠脂肪细胞,L13T3细胞

XY0111 小鼠脂肪细胞,3T3-L1细胞

XY0112 小鼠正常肝细胞,NCTC1469细胞

XY0113 小鼠杂交瘤细胞CD25 PC61细胞

XY0114 小鼠杂交瘤细胞,ST2/o细胞

XY0115 小鼠原成骨细胞,MC3T3-E1 Subclone 14细胞

XY0116 小鼠原B细胞株 BaF3细胞

XY0117 小鼠胰腺腺泡细胞癌细胞,MPC-83细胞

XY0118 小鼠胰腺癌细胞,LTPA细胞

XY0119 小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞,Beta-TC-6细胞,

XY0120 小鼠胰岛素瘤β细胞（NOD/Lt转基因小鼠，SV40巨T抗原） NIT-1细胞

XY0121 小鼠胰岛素瘤β细胞,NIT-1β细胞,

XY0122 小鼠胰岛内皮细胞,MS1细胞,

XY0123 小鼠胰岛β细胞株 Min6细胞

XY0124 小鼠血细胞,WEHI-3细胞

XY0125 小鼠血管瘤内皮细胞,EOMA细胞,

XY0126 小鼠小胶质细胞,BV2细胞

XY0127 小鼠胃癌细胞,MFC细胞,

XY0128 小鼠网织细胞肉瘤 M5076细胞

XY0129 小鼠饲养层上皮细胞,HPT-8细胞

XY0130 小鼠树突状细胞肉瘤细胞,DCS细胞

XY0131 小鼠树突状细胞,DC2.4细胞,