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人急性早幼粒白血病细胞(悬浮)操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,人急性早幼粒白血病细胞(悬浮)此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:人急性早幼粒白血病细胞(悬浮)取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 人急性早幼粒白血病细胞(悬浮) 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。人急性早幼粒白血病细胞(悬浮)传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY1103 人肺癌细胞,PC9细胞
XY1104 人肺癌细胞,PC9-EGFP-puro细胞
XY1105 人肺癌细胞,PC14细胞
XY1106 人肺癌细胞,NCI-H1975细胞
XY1107 人肺癌细胞,LECPα-1细胞,
XY1108 人肺癌细胞,Human A549细胞
XY1109 人肺癌细胞,H125细胞
XY1110 人肺癌细胞,Calu-1细胞
XY1111 人肺癌细胞,A549细胞
XY1112 人肺癌细胞,A549-EGFP-puro细胞
XY1113 人肺癌细胞,A-427细胞
XY1114 人肺癌细胞,973细胞
XY1115 人肥大细胞白血病细胞,CHMAS细胞
XY1116 人非雄激素依赖型前列腺癌细胞,Tsu-Pr1细胞
XY1117 人非小细胞肺腺癌细胞,NCI-H2087细胞
XY1118 人非小细胞肺腺癌细胞,NCI-H1975细胞
XY1119 人非小细胞肺腺癌细胞,NCI-H157细胞
XY1120 人非小细胞肺癌细胞,NCI-H838细胞
XY1121 人非小细胞肺癌细胞,NCI-H23细胞
XY1122 人非小细胞肺癌细胞,NCIH1650-M3细胞
XY1123 人非小细胞肺癌细胞,NCIH1299细胞
XY1124 人非小细胞肺癌细胞,HCC827细胞
XY1125 人非小细胞肺癌细胞,H322细胞
XY1126 人非小细胞肺癌细胞,A549细胞
XY1127 人非小细胞肺癌 SW-1573细胞
XY1128 人非小细胞肺癌 H1299细胞
XY1129 人恶性胚胎横纹肌瘤细胞,RD细胞,
XY1130 人恶性胶质瘤细胞,U87 MG细胞
XY1131 人恶性横纹肌肉瘤 PLA-802细胞
XY1132 人恶性黑色素瘤细胞,A375细胞
XY1133 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞,NK-92细胞
XY1134 人多形性恶性胶质瘤 T98G [T98-G]细胞