大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒实验操作中常见问题分析

由于大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒具有灵敏度较高、特异性好的特点，已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个，但作为专业的洗板机生产厂家，我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的 试剂 ，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意，就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常，而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下，以期给大家带来一些启发，以改善洗板机的安装调试水平，提高临床检测质量。

大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素

严重溶血 ，以 HRP 为标记的ELISA 测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ，样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。

大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测，严重溶血标本禁用。一般说来，在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合，使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落，所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本，肝素抗凝血浆会增加OD值，可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。

xyB225Hu 人神经细胞黏附分子(NCAM)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neural HZll Adhesion Molecule (NCAM)

xyA747Hu 人抗补体1q抗体(Anti-C1q)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Anti-Complement 1q Antibody (Anti-C1q)

xyB224Hu 人胃泌素(GT)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Gastrin (GT)

xyB230Hu 人细胞毒性T-淋巴细胞关联抗原4(CTLA4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Antigen 4 (CTLA4)

xyB231Hu 人角蛋白18(KRT18)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Keratin 18 (KRT18)

xyB232Hu 人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Matrix ExtraHZllular Phosphoglycoprotein (MEPE)

xyB233Hu 人周期素依赖性激酶4(CDK4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)

xyB234Hu 人杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Bactericidal/Permeability Increasing Protein (BPI)

xyB236Hu 人纤溶酶原(Plg)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Plasminogen (Plg)

xyB237Hu 人纤维蛋白肽A(FPA)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Fibrinopeptide A (FPA)大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒

xyB238Hu 人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Acylation Stimulating Protein (ASP)

xyB239Hu 人角蛋白19(KRT19)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Keratin 19 (KRT19)

xyB240Hu 人角蛋白20(KRT20)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Keratin 20 (KRT20)

xyB241Hu 人Kruppel样因子4(KLF4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Kruppel Like Factor 4, Gut (KLF4)

xyB242Hu 人ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for ATP Binding Cassette Transporter A1 (ABCA1)

xyB244Hu 人利钾尿肽(KP)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Kaliuretic Peptide (KP)

xyB243Hu 人心型脂肪酸结合蛋白(FABP3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle And Heart (FABP3)

xyA688Hu 人TGFβ诱导早期应答基因1(TIEG1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)

xyB248Hu 人胸腺表达趋化因子(TECK)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Thymus Expressed Chemokine (TECK)

xyB252Hu 人雄激素受体(AR)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Androgen ReHZptor (AR)