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大鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒实验操作中常见问题分析
由于大鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒具有灵敏度较高、特异性好的特点,已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个,但作为专业的洗板机生产厂家,我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的 试剂 ,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意,就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下,以期给大家带来一些启发,以改善洗板机的安装调试水平,提高临床检测质量。
大鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素
严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
大鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
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xyE382Hu 人钠/葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Sodium/Glucose Cotransporter 2 (SGLT2)
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xyE459Hu 人线粒体铁蛋白(MFRN)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Mitoferrin (MFRN)
xyE474Hu 人溶质载体家族26成员4(SLC26A4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Solute Carrier Family 26, Member 4 (SLC26A4)
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xyE671Hu 人SHC-转化蛋白1(SHC1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for SHC-Transforming Protein 1 (SHC1)
xyE673Hu 人羟甲基胆素合酶(HMBS)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Hydroxymethylbilane Synthase (HMBS)
xyE698Hu 人鞘氨醇激酶1(SPHK1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Sphingosine Kinase 1 (SPHK1) 大鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒
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xyE748Hu 人亲核素α2(KPNα2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Karyopherin Alpha 2 (KPNa2)
xyE779Hu 人膜联蛋白A9(ANXA9)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Annexin A9 (ANXA9)
xyE780Hu 人膜联蛋白A10(ANXA10)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Annexin A10 (ANXA10)
xyE842Hu 人白介素1ζ(IL1ζ)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Interleukin 1 Zeta (IL1z)
xyE909Hu 人组蛋白脱乙酰基酶9(HDAC9)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Histone DeaHZtylase 9 (HDAC9)
xyE913Hu 人沉默调节蛋白3(SIRT3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Sirtuin 3 (SIRT3)
xyE915Hu 人沉默调节蛋白5(SIRT5)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Sirtuin 5 (SIRT5)
xyE917Hu 人沉默调节蛋白7(SIRT7)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Sirtuin 7 (SIRT7)
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xyF205Hu 人腺苷酸激酶3(AK3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Adenylate Kinase 3 (AK3)
xyF255Hu 人钙蛋白酶6(CAPN6)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Calpain 6 (CAPN6)
xyF264Hu 人羰基还原酶3(CBR3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Carbonyl Reductase 3 (CBR3)
xyF295Hu 人封闭蛋白5(CLDN5)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Claudin 5 (CLDN5)
xyF317Hu 人羧肽酶A4(CPA4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Carboxypeptidase A4 (CPA4)
xyF387Hu 人二肽酶3(DPEP3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Dipeptidase 3 (DPEP3)