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大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒实验操作中常见问题分析
由于大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒具有灵敏度较高、特异性好的特点,已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个,但作为专业的洗板机生产厂家,我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的 试剂 ,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意,就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下,以期给大家带来一些启发,以改善洗板机的安装调试水平,提高临床检测质量。
大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素
严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
xyG531Hu 人溶血卵磷脂酰基转移酶3(LPCAT3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 3 (LPCAT3)
xyG610Hu 人芳基硫酸酯酶B(ARSB)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Arylsulfatase B (ARSB)
xyG820Hu 人甘胺酸-N-甲基转移酶(GNMT)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Glycine-N-Methyltransferase (GNMT)
xyG919Hu 人尿苷二磷酸糖基转移酶8(UGT8)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for UDP Glycosyltransferase 8 (UGT8)
xyG948Hu 人泛醌蛋白2(UBQLN2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Ubiquilin 2 (UBQLN2)
xyG963Hu 人胸苷酸合成酶(TYMS)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Thymidylate Synthetase (TYMS)
xyH015Hu 人踝蛋白2(TLN2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Talin 2 (TLN2)
xyH033Hu 人转谷氨酰胺酶6(TGM6)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Transglutaminase 6 (TGM6)
xyH088Hu 人突触极蛋白2(SYNPO2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Synaptopodin 2 (SYNPO2) 大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒
xyH097Hu 人亚硫酸盐氧化酶(SUOX)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Sulfite Oxidase (SUOX)
xyH108Hu 人硫酸酯酶1(SULF1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Sulfatase 1 (SULF1)
xyH135Hu 人角鲨烯单加氧酶(SQLE)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Squalene Epoxidase (SQLE)
xyH178Hu 人N-磺氨基葡糖磺基氢化酶(SGSH)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for N-Sulfoglucosamine Sulfohydrolase (SGSH)
xyH234Hu 人核黄素激酶(RFK)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Riboflavin Kinase (RFK)
xyH244Hu 人网钙蛋白2(RCN2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Reticulocalbin 2 (RCN2)
xyH366Hu 人丝束蛋白1(PLS1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Plastin 1 (PLS1)
xyH428Hu 人异戊烯半胱氨酸氧化酶1(PCYOX1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Prenylcysteine Oxidase 1 (PCYOX1)
xyH578Hu 人NAD激酶(NADK)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for NAD Kinase (NADK)
xyH582Hu 人肌原调节蛋白2(MYOZ2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Myozenin 2 (MYOZ2)
xyH585Hu 人肌间蛋白2(MYOM2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Myomesin 2 (MYOM2)
xyH590Hu 人生肌因子5(MYF5)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Myogenic Factor 5 (MYF5)
xyH609Hu 人亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Methylenetetrahydrofolate Reductase (MTHFR)
xyH673Hu 人苹果酸脱氢酶1(MDH1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Malate Dehydrogenase 1 (MDH1)
xyH755Hu 人犬尿氨酸-3-单加氧酶(KMO)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Kynurenine-3-Monooxygenase (KMO)
xyH816Hu 人白介素4诱导蛋白1(IL4I1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Interleukin 4 InduHZd Protein 1 (IL4I1)