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大鼠胆碱乙酰转移酶(CHAT)ELISA试剂盒实验操作中常见问题分析
由于大鼠胆碱乙酰转移酶(CHAT)ELISA试剂盒具有灵敏度较高、特异性好的特点,已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个,但作为专业的洗板机生产厂家,我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的 试剂 ,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意,就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下,以期给大家带来一些启发,以改善洗板机的安装调试水平,提高临床检测质量。
大鼠胆碱乙酰转移酶(CHAT)ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素
严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
大鼠胆碱乙酰转移酶(CHAT)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
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xyA884Ra 大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Dipeptidyl PeptidaHZ IV (DPP4)
xyA811Ra 大鼠血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Angiotensin I (AngI)
xyA594Ra 大鼠细胞色素C(CYCS)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Cytochrome C, Somatic (CYCS)大鼠胆碱乙酰转移酶(CHAT)ELISA试剂盒
xyA812Ra 大鼠胰淀素(IAPP)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)
xyA798Ra 大鼠低氧诱导因子1α(HIF1α)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1a)
xyA823Ra 大鼠90kDa热休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Beta 1 (HSP90b1)
xyB960Ra 大鼠超氧化物歧化酶1(SOD1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Superoxide DismutaHZ 1, Soluble (SOD1)
xyA822Ra 大鼠60kD热休克蛋白(HSPD1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Heat Shock 60kD Protein 1, Chaperonin (HSPD1)
xyA815Ra 大鼠神经型一氧化氮合酶(NOS1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Nitric Oxide SynthaHZ 1, Neuronal (NOS1)
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xyA821Ra 大鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for C Reactive Protein (CRP)
xyA886Ra 大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated