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大鼠酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒实验操作中常见问题分析
由于大鼠酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒具有灵敏度较高、特异性好的特点,已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个,但作为专业的洗板机生产厂家,我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的 试剂 ,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意,就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下,以期给大家带来一些启发,以改善洗板机的安装调试水平,提高临床检测质量。
大鼠酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素
严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
大鼠酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
xyQ277Ra 大鼠内向整流型钾离子通道亚家族J成员5(KCNJ5)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Potassium Inwardly Rectifying Channel Subfamily J, Member 5 (KCNJ5)
xyD706Ra 大鼠蛋白信号调节因子6(RGS6)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Regulator Of G Protein Signaling 6 (RGS6)
xyB555Ra 大鼠解整合素金属蛋白酶17(ADAM17)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for A Disintegrin And MetalloproteaHZ 17 (ADAM17)
xyD099Ra 大鼠低密度脂蛋白受体相关蛋白8(LRP8)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Low Density Lipoprotein ReHZptor Related Protein 8 (LRP8)
xyG171Ra 大鼠Disabled同源物1(DAB1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Disabled Homolog 1 (DAB1)
xyA725Ra 大鼠葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for GlucoHZ 6 Phosphate IsomeraHZ (GPI)
xyB684Ra 大鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 3 (SOCS3)
xyC178Ra 大鼠神经蛋白聚糖(NCAN)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neurocan (NCAN) 大鼠酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒
xyH154Ra 大鼠细胞因子信号转导抑制因子2(SOCS2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 2 (SOCS2)
xyH158Ra 大鼠细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 1 (SOCS1)
xyD523Ra 大鼠90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Alpha A1 (HSP90aA1)
xyB518Ra 大鼠白介素1受体关联激酶4(IRAK4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Interleukin 1 ReHZptor Associated KinaHZ 4 (IRAK4)
xyL818Ra 大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3)
xyA543Ra 大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Immunoglobulin M (IgM)
xyB409Ra 大鼠血红蛋白(HB)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Hemoglobin (HB)