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大鼠趋化素(CHEM)ELISA试剂盒实验操作中常见问题分析
由于大鼠趋化素(CHEM)ELISA试剂盒具有灵敏度较高、特异性好的特点,已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个,但作为专业的洗板机生产厂家,我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的 试剂 ,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意,就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下,以期给大家带来一些启发,以改善洗板机的安装调试水平,提高临床检测质量。
大鼠趋化素(CHEM)ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素
严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
大鼠趋化素(CHEM)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
xyH694Hu 人甘露糖苷酶α2B类成员1(MAN2B1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Mannosidase Alpha Class 2B Member 1 (MAN2B1)
xyD516Hu 人载脂蛋白L2(APOL2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Apolipoprotein L2 (APOL2)
xyL059Hu 人帕金森氏病蛋白7(PARK7)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Parkinson Disease Protein 7 (PARK7)
xyA707Hu 人前胰岛素样生长因子ⅡE肽(Preptin)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Preptin
xyB347Hu 人垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 1, Pituitary (ADCYAP1)
xyB210Hu 人接触蛋白4(CNTN4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Contactin 4 (CNTN4)
xyJ459Hu 人神经酰胺激酶(HZRK)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for HZramide Kinase (HZRK)
大鼠趋化素(CHEM)ELISA试剂盒
xyA885Hu 人血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Serum Amyloid A (SAA)
xyA263Hu 人线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Creatine Kinase, Mitochondrial 1A (CKMT1A)
xyB735Hu 人胱天蛋白酶4(CASP4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Caspase 4 (CASP4)
xyA051Hu 人胰岛素样生长因子2(IGF2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2)
xyA060Hu 人白介素13(IL13)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Interleukin 13 (IL13)
xyA176Hu 人Ⅲ型胶原(COL3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Collagen Type III (COL3)
xyA853Hu 人胱天蛋白酶8(CASP8)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Caspase 8 (CASP8)
xyA172Hu 人血小板因子4(PF4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Platelet Factor 4 (PF4)
xyB939Hu 人多配体蛋白聚糖4(SDC4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Syndecan 4 (SDC4)
xyB940Hu 人组织因子通道抑制因子2(TFPI2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor 2 (TFPI2)
xyA950Hu 人血管性血友病因子裂解蛋白酶(vWFcp)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Von Willebrand Factor Cleaving Protease (vWFCP)
xyA170Hu 人激活素B(ACVB)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Activin B (ACVB)
xyB426Hu 人CD99分子(CD99)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 99 (CD99)
xyA183Hu 人半乳糖苷酶α(GLα)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Galactosidase Alpha (GLa)
xyA692Hu 人神经纤维网蛋白1(NRP1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neuropilin 1 (NRP1)
xyD042Hu 人神经纤维网蛋白2(NRP2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neuropilin 2 (NRP2)