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大鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒实验操作中常见问题分析
由于大鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒具有灵敏度较高、特异性好的特点,已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个,但作为专业的洗板机生产厂家,我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的 试剂 ,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意,就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下,以期给大家带来一些启发,以改善洗板机的安装调试水平,提高临床检测质量。
大鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素
严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
大鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
xyR761Ra 大鼠γ-分泌激活蛋白(γSAP)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Gamma-HZcretaHZ Activating Protein (gSAP)
xyA739Ra 大鼠周期素依赖性激酶5(CDK5)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Cyclin Dependent KinaHZ 5 (CDK5)
xyE697Ra 大鼠鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶2(SGPP2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Sphingosine-1-Phosphate PhosphataHZ 2 (SGPP2)
xyB038Ra 大鼠谷氨酸半胱氨酸连接酶(GCLM)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Glutamate Cysteine LigaHZ, Modifier Subunit (GCLM)
xyE696Ra 大鼠鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1(SGPP1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Sphingosine-1-Phosphate PhosphataHZ 1 (SGPP1)
xyB324Ra 大鼠钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Caldesmon (CALD)
xyC042Ra 大鼠法尼酯X受体(FXR)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Farnesoid X ReHZptor (FXR)
xyC150Ra 大鼠Ⅵ型胶原α1(COL6α1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Collagen Type VI Alpha 1 (COL6a1)
xyC172Ra 大鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒大鼠神经调节素2(NRG2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neuregulin 2 (NRG2)
xyC348Ra 大鼠丁酰胆碱酯酶(BCHE)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for ButyrylcholinesteraHZ (BCHE)
xyC856Ra 大鼠Smoothelin蛋白(SMTN)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Smoothelin (SMTN)
xyC901Ra 大鼠死亡诱导终结因子1(DIDO1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Death InduHZr Obliterator 1 (DIDO1)
xyD066Ra 大鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Apelin (APLN)
xyD965Ra 大鼠肝受体同源物1(LRH1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Liver ReHZptor Homolog 1 (LRH1)
xyE402Ra 大鼠阳离子氨基酸转运蛋白2(CAT2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Cationic Amino Acid Transporter 2 (CAT2)
xyB206Ra 大鼠丝裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Mitogen Activated Protein KinaHZ 14 (MAPK14)
xyB889Ra 大鼠周期素依赖性激酶2(CDK2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Cyclin Dependent KinaHZ 2 (CDK2)
xyC924Ra 大鼠肾上腺素能受体β1(ADRβ1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Adrenergic ReHZptor Beta 1 (ADRb1)
xyF639Ra 大鼠磷酸二酯酶3A(PDE3A)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for PhosphodiesteraHZ 3A, cGMP Inhibited (PDE3A)
xyA792Ra 大鼠拓扑异构酶Ⅱ(TOP2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for TopoisomeraHZ II (TOP2)
xyA764Ra 大鼠叉头框蛋白O1(FOXO1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Forkhead Box Protein O1 (FOXO1)
xyA959Ra 大鼠L1-细胞粘附分子(L1CAM)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for L1-HZll Adhesion Molecule (L1CAM)
xyB659Ra 大鼠胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 ReHZptor (IGF1R)
xyB540Ra 大鼠细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for ExtraHZllular Matrix MetalloproteinaHZ InduHZr (EMMPRIN)