产品详情
人新生儿促甲状腺素(N-TSH)
ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用
试验原理:
N-TSH试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知N-TSH浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将N-TSH物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中N-TSH的活性浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48份酶标板 | 1块板(96T) | 半块板(48T) | 即用型 |
塑料膜板盖 | 1块 | 半块 | 即用型 |
标准品:400ng/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按说明书进行稀稀 |
空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
标准品稀释缓冲液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
生物素标记N-TSH抗体 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
亲和链酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗涤缓冲液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按说明书进行稀释 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人新生儿促甲状腺素(N-TSH)
ELISA 检测试剂盒
操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人新生儿促甲状腺素(N-TSH)
ELISA 检测试剂盒
样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
400ng/ml | (6号标准品) | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 |
200ng/ml | (5号标准品) | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 |
100ng/ml | (4号标准品) | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
50ng/ml | (3号标准品) | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
25ng/ml | (2号标准品) | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
12.5ng/ml | (1号标准品) | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
0ng/ml | (空白对照) | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
人新生儿促甲状腺素(N-TSH)
ELISA 检测试剂盒
操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
4.局限性:6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
结果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的N-TSH标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的N-TSH含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-400ng/ml
4、敏感度: 1.0ng/ml
相关产品如下:
XY-EL-R0647c 大鼠N -乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)ELISA试剂盒 Rat NAGase (N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase) ELISA Kit
XY-EL-R0648c 大鼠N-乙酰半乳糖胺-6-硫酸酯酶(GAS)ELISA试剂盒 Rat GAS (N-Acetylgalactosamine 6-Sulfatase) ELISA Kit
XY-EL-R0651c 大鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒 Rat NN-T4 (Neonatal Thyroxine) ELISA Kit
XY-EL-R0652c 大鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 Rat NGF (Nerve Growth Factor) ELISA Kit
XY-EL-R0653c 大鼠神经细胞粘附分子(NCAM/CD56)ELISA试剂盒 Rat NCAM/CD56 (Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit
XY-EL-R0654c 大鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒 Rat NGB (Neuroglobin) ELISA Kit
XY-EL-R0655c 大鼠神经肽Y(NPY)ELISA试剂盒 Rat NPY (Neuropeptide Y) ELISA Kit
XY-EL-R0656c 大鼠神经营养性酪氨酸激酶2型受体(NTRK2)ELISA试剂盒 Rat NTRK2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) ELISA Kit
XY-EL-R0657c 大鼠神经营养因子受体受体酪氨酸激酶受体3型(NTRK3)ELISA试剂盒 Rat NTRK3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) ELISA Kit
XY-EL-R0658c 大鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒 Rat NT-3 (Neurotrophin 3) ELISA Kit
XY-EL-R0659c 大鼠神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒 Rat NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit
XY-EL-R0660c 大鼠中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)ELISA试剂盒 Rat NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) ELISA Kit
XY-EL-R0661c 大鼠中性粒细胞激活蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA试剂盒 Rat NAP-2 (Neutrophil Activating Protein-2) ELISA Kit
XY-EL-R0662c 大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒 Rat NGAL (Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit
XY-EL-R0663c 大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX 1)ELISA试剂盒 Rat NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit
XY-EL-R0664c 大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX 4)ELISA试剂盒 Rat NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4) ELISA Kit
XY-EL-R0665c 大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA试剂盒 Rat NADPH (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate) ELISA Kit
XY-EL-R0666c 大鼠烟碱型乙酰胆碱受体(N-AChR)ELISA试剂盒 Rat N-ACHR (Nicotinic Acetylcholine Receptor) ELISA Kit
XY-EL-R0670c 大鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒 Rat NT-proBNP (N-Terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit
XY-EL-R0671c 大鼠III型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 Rat PIIINP (N-Terminal Procollagen III Propeptide) ELISA Kit
XY-EL-R0672c 大鼠白介素3调节D的核因子(NFIL3)ELISA试剂盒 Rat NFIL3 (Nuclear Factor, Interleukin 3 Regulated) ELISA Kit
XY-EL-R0673c 大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒 Rat NF-κB (Nuclear Factor Kappa B)ELISA Kit
XY-EL-R0674c 大鼠核因子κB亚基p65(NF-κB p65)ELISA试剂盒 Rat NF-κB p65(Nuclear Factor-κB P65) ELISA Kit
XY-EL-R0675c 大鼠核受体相互作用蛋白1(NRIP1)ELISA试剂盒 Rat NRIP1 (Nuclear Receptor Interacting Protein 1) ELISA Kit
XY-EL-R0676c 大鼠核RNA输出因子1(NXF1)ELISA试剂盒 Rat NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit
XY-EL-R0677c 大鼠核孔蛋白107kda(NUP107)ELISA试剂盒 Rat NUP107 (Nucleoporin 107kDa) ELISA Kit
XY-EL-R0678c 大鼠核孔蛋白153kda(NUP153)ELISA试剂盒 Rat NUP153 (Nucleoporin 153kDa) ELISA Kit