产品详情
人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)
ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用
试验原理:
HELIX-Ⅱ试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知HELIX-Ⅱ浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先HELIX-Ⅱ物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HELIX-Ⅱ活性浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48份酶标板 | 1块板(96T) | 半块板(48T) | 即用型 |
塑料膜板盖 | 1块 | 半块 | 即用型 |
标准品:400ng/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按说明书进行稀稀 |
空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
标准品稀释缓冲液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
生物素标记HELIX-Ⅱ抗体 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
亲和链酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗涤缓冲液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按说明书进行稀释 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)
ELISA 检测试剂盒
操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)
ELISA 检测试剂盒
样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
400ng/ml | (6号标准品) | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 |
200ng/ml | (5号标准品) | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 |
100ng/ml | (4号标准品) | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
50ng/ml | (3号标准品) | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
25ng/ml | (2号标准品) | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
12.5ng/ml | (1号标准品) | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
0ng/ml | (空白对照) | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)
ELISA 检测试剂盒
操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
4.局限性:6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
结果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的HELIX-Ⅱ标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的HELIX-Ⅱ含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-400ng/ml
4、敏感度: 1.0ng/ml
相关产品如下:
XY-EL-M1000c 小鼠肝脏及红细胞丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒 Mouse PK (Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit
XY-EL-M1001c 小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒 Mouse M2-PK (Pyruvate Kinase) ELISA Kit
XY-EL-M1002c 小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒 Mouse PK (Pyruvate Kinase) ELISA Kit
XY-EL-M1003c 小鼠Qa淋巴细胞抗原2(Qa-2)ELISA试剂盒 Mouse Qa-2 (Qa Lymphocyte Antigen 2 Region) ELISA Kit
XY-EL-M1004c 小鼠Rap鸟嘌呤交换因子2(RAPGEF2)ELISA试剂盒 Mouse RAPGEF2 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 2) ELISA Kit
XY-EL-M1005c 小鼠RasGTP酶激活蛋白(RasGAP)ELISA试剂盒 Mouse RasGAP (Ras GTPase Activating Protein) ELISA Kit
XY-EL-M1008c 小鼠胰岛源性再生因子4(REG4)ELISA试剂盒 Mouse REG4 (Regenerating Islet Derived Protein 4) ELISA Kit
XY-EL-M1009c 小鼠G蛋白信号调节蛋白4(RGS4)ELISA试剂盒 Mouse RGS4 (Regulator Of G Protein Signaling 4) ELISA Kit
XY-EL-M1012c 小鼠呼吸道合胞病毒IgA(RSV-IgA) ELISA试剂盒 Mouse RSV-IgA (Respiratory syncytial virus IgA) ELISA Kit
XY-EL-M1013c 小鼠呼吸道合胞病毒IgD(RSV-IgD) ELISA试剂盒 Mouse RSV-IgD (Respiratory syncytial virus IgD) ELISA Kit
XY-EL-M1014c 小鼠呼吸道合胞病毒IgG(RSV-IgG) ELISA试剂盒 Mouse RSV-IgG (Respiratory syncytial virus IgG) ELISA Kit
XY-EL-M1015c 小鼠呼吸道合胞病毒IgM(RSV-IgM) ELISA试剂盒 Mouse RSV-IgM (Respiratory syncytial virus IgM) ELISA Kit
XY-EL-M1016c 小鼠视黄醇结合蛋白4(RBP4)ELISA试剂盒 Mouse RBP4 (Retinol Binding Protein 4, Plasma) ELISA Kit
XY-EL-M1019c 小鼠核糖核苷酸酶A(RNASEA)ELISA试剂盒 Mouse RNASEA (Ribonuclease A) ELISA Kit
XY-EL-M1020c 小鼠核糖核苷酸酶H(RNASEH)ELISA试剂盒 Mouse RNASEH (Ribonuclease H) ELISA Kit
XY-EL-M1021c 小鼠核糖核苷酸酶T2(RNASET2)ELISA试剂盒 Mouse RNASET2 (Ribonuclease T2) ELISA Kit
XY-EL-M1022c 小鼠核糖体蛋白L10(RPL10)ELISA试剂盒 Mouse RPL10 (Ribosomal Protein L10) ELISA Kit
XY-EL-M1023c 小鼠核糖体蛋白L26(RPL26)ELISA试剂盒 Mouse RPL26 (Ribosomal Protein L26) ELISA Kit
XY-EL-M1024c 小鼠环指蛋白4(RNF4)ELISA试剂盒 Mouse RNF4 (Ring Finger Protein 4) ELISA Kit
XY-EL-M1030c 小鼠Runt相关转录因子2(RUNX2)ELISA试剂盒 Mouse RUNX2 (Runt Related Transcription Factor 2) ELISA Kit
XY-EL-M1031c 小鼠钙结合蛋白S100A11(S100A11) ELISA试剂盒 Mouse S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit
XY-EL-M1032c 小鼠钙结合蛋白S100A7(S100A7) ELISA试剂盒 Mouse S100A7 (S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit
XY-EL-M1033c 小鼠S100钙结合蛋白B (S100B) ELISA试剂盒 Mouse S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit
XY-EL-M1035c 小鼠钙结合蛋白S100A6(S100A6) ELISA试剂盒 Mouse S100A6 (S100 Calcium Binding Protein A6) ELISA Kit
XY-EL-M1036c 小鼠S100钙结合蛋白A12(S100A12 )ELISA试剂盒 Mouse S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit