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(1)人T-细胞可诱导共刺激分子(ICOS)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人T-细胞可诱导共刺激分子(ICOS)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人T-细胞可诱导共刺激分子(ICOS)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人T-细胞可诱导共刺激分子(ICOS)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzB028Rb 兔白蛋白(ALB)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Albumin (ALB) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA099Rb 兔基质金属蛋白酶13(MMP13)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA104Rb 兔胆囊收缩素A受体(CCKAR)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA303Rb 兔半乳糖凝集素3(GAL3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA002Rb 兔白细胞激活黏附因子(ALCAM)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA109Rb 兔肌肌酸激酶(CKM)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzC011Rb 兔补体因子B(CFB)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Complement Factor B (CFB) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA117Rb 兔胞外超氧化物歧化酶(SOD3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA123Rb 兔转化生长因子α(TGFα)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA128Rb 兔组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA006Rb 兔双调蛋白(AREG)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Amphiregulin (AREG) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA214Rb 兔窖蛋白(CAV1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA131Rb 兔转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Induced Protein (TGFbI) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA130Rb 兔组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA134Rb 兔肿瘤坏死因子β(TNFβ)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Beta (TNFb) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA061Rb 兔白介素15(IL15)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interleukin 15 (IL15) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA223Rb 兔白介素1受体拮抗剂(IL1RA)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA064Rb 兔白介素18(IL18)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA178Rb 兔α2-HS糖蛋白(αHSG)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA164Rb 兔泛素(Ub)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA227Rb 兔亲环素B(CYPB)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cyclophilin B (CYPB) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
hzA874Rb 人T-细胞可诱导共刺激分子(ICOS)检测试剂盒兔缓激肽(BK)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Bradykinin (BK) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)