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(1)人白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
HZC828Mu 小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tripeptidyl Peptidase I (TPP1)
HZA348Mu 小鼠组织蛋白酶A(CTSA)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cathepsin A (CTSA)
HZC123Mu 小鼠Smad同源物3(Smad3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3 (Smad3)
HZC972Mu 小鼠转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβR2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Receptor II (TGFbR2)
HZL437Mu 小鼠δ样蛋白1同源物(δLK1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Delta Like 1 Homolog (dLK1)
HZG291Mu 小鼠鸟苷酸环化酶激活因子2A(GUCA2A)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Guanylate Cyclase Activator 2A (GUCA2A)
HZD243Mu 小鼠周期素依赖性激酶8(CDK8)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase 8 (CDK8)
HZB008Mu 小鼠低密度脂蛋白受体(LDLR)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor (LDLR)
HZB693Mu 小鼠脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 4, Adipocyte (FABP4)
HZC043Mu 小鼠维甲酸X受体α(RXRα)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Retinoid X Receptor Alpha (RXRa)
HZK042Mu 小鼠肌肽合酶1(CARNS1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Carnosine Synthase 1 (CARNS1)
HZB521Mu 小鼠黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Mucosal Addressin Cell Adhesion Molecule 1 (MAdCAM1)
HZD104Mu 小鼠低密度脂蛋白受体衔接蛋白1(LDLRAP1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Adaptor Protein 1 (LDLRAP1)
HZA773Mu 小鼠糖皮质激素受体β(GRβ)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Beta (GRb)
HZA774Mu 小鼠糖皮质激素受体α(GRα)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Alpha (GRa)
HZE675Mu 小鼠再生胰岛衍生蛋白3α(REG3α)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Alpha (REG3a)
HZG697Mu 小鼠G蛋白偶联受体120(GPR120)检测试剂盒规格 ELISA Kit for G Protein Coupled Receptor 120 (GPR120)
HZC216Mu 小鼠E1A结合蛋白P300(EP300)检测试剂盒规格 ELISA Kit for E1A Binding Protein P300 (EP300)
HZG817Mu 小鼠多胺氧化酶(PAOX)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Polyamine Oxidase (PAOX) 人白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)检测试剂盒
HZC187Mu 小鼠V-Erb B2红白血病病毒癌基因同源物3(ErbB3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for V-Erb B2 Erythroblastic Leukemia Viral Oncogene Homolog 3 (ErbB3)
HZA713Mu 小鼠CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)检测试剂盒规格 ELISA Kit for CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta (CEBPb)
HZC759Mu 小鼠静止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1)
HZB797Mu 小鼠成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor 3 (FGFR3)