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(1)人谷氨酸脱羧酶样蛋白1(GADL1)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人谷氨酸脱羧酶样蛋白1(GADL1)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人谷氨酸脱羧酶样蛋白1(GADL1)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人谷氨酸脱羧酶样蛋白1(GADL1)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzF701Hu 人氧固醇结合蛋白样蛋白8(OSBPL8)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Oxysterol Binding Protein Like Protein 8 (OSBPL8)
hzG107Hu 人衔接因子相关蛋白复合体2μ1(AP2μ1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Adaptor Related Protein Complex 2 Mu 1 (AP2m1)
hzG462Hu 人5-甲基四氢叶酸高半胱氨酸甲基转移酶(MTR)检测试剂盒规格 ELISA Kit for 5-Methyltetrahydrofolate Homocysteine Methyltransferase (MTR)
hzH031Hu 人前列腺转谷氨酰胺酶(TGM4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Transglutaminase 4, Prostate (TGM4)
hzH255Hu 人维甲酸受体应答基因1(RARRES1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Retinoic Acid ReHZptor Responder 1 (RARRES1)
hzK066Hu 人四加半LIM域蛋白1(FHL1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Four And A Half LIM Domains Protein 1 (FHL1)
hzE258Hu 人前胶原赖氨酸-2-酮戊二酸-5-双加氧酶1(PLOD3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Procollagen Lysine-2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 3 (PLOD3)
hzE431Hu 人溶质载体家族16成员1(SLC16A1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Solute Carrier Family 16, Member 1 (SLC16A1)
hzA906Hu 人趋化因子C-C-基元受体5(CCR5)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif ReHZptor 5 (CCR5)
hzM449Hu 人Canopy 2同源物(CNPY2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Canopy 2 Homolog (CNPY2)
hzD421Hu 人肌球蛋白重链8(MYH8)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 8, Skeletal Muscle, Perinatal (MYH8)
hzE269Hu 人B-淋巴酪氨酸激酶(BLK)检测试剂盒规格 ELISA Kit for B-Lymphoid Tyrosine Kinase (BLK)
hzG901Hu 人电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Voltage Dependent Anion Channel Protein 1 (VDAC1)
hzB108Hu 人谷氨酸脱羧酶样蛋白1(GADL1)检测试剂盒人血小板膜糖蛋白Ⅰbα多肽(GP1Ba)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Glycoprotein Ib Alpha Polypeptide, Platelet (GP1Ba)
hzM427Hu 人Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1)
hzE320Hu 人Ras同源基因家族成员A(RHOA)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Ras Homolog Gene Family, Member A (RHOA)
hzE614Hu 人细胞分裂周期因子42(CDC42)检测试剂盒规格 ELISA Kit for HZll Division Cycle Protein 42 (CDC42)
hzH911Hu 人肝细胞生长因子激活因子(HGFAC)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor Activator (HGFAC)
hzE879Hu 人分拣连接蛋白9(SNX9)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Sorting Nexin 9 (SNX9)