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(1)人无翅型MMTV整合位点家族成员10A(WNT10A)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人无翅型MMTV整合位点家族成员10A(WNT10A)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人无翅型MMTV整合位点家族成员10A(WNT10A)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人无翅型MMTV整合位点家族成员10A(WNT10A)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzB466Hu 人间隙连接蛋白37(CX37)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Connexin 37 (CX37)
hzD578Hu 人丝裂原激活蛋白激酶13(MAPK13)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase 13 (MAPK13)
hzD577Hu 人丝裂原激活蛋白激酶12(MAPK12)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase 12 (MAPK12)
hzC847Hu 人S-期激酶关联蛋白2(SKP2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for S-Phase Kinase Associated Protein 2 (SKP2)
hzC826Hu 人高亲和力神经降压素受体1(NTSR1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Neurotensin ReHZptor 1, High Affinity (NTSR1)
hzC597Hu 人病毒诱导信号适配蛋白(VISA)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Virus InduHZd Signaling Adapter (VISA)
hzE640Hu 人受体相互作用丝氨酸苏氨酸激酶1(RIPK1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for ReHZptor Interacting Serine Threonine Kinase 1 (RIPK1)
hzE451Hu 人尿酸盐转运蛋白1(URAT1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Urate Transporter 1 (URAT1)
hzE379Hu 人阴离子/糖转运蛋白(AST)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Anion/Sugar Transporter (AST)
hzD927Hu 人二肽基肽酶8(DPP8)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 8 (DPP8)
hzH678Hu 人Matrin 3蛋白(MATR3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Matrin 3 (MATR3)
hzG613Hu 人芳基硫酸酯酶F(ARSF)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Arylsulfatase F (ARSF)
hzF458Hu 人含黄素单加氧酶1(FMO1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Flavin Containing Monooxygenase 1 (FMO1)
hzF386Hu 人二肽酶2(DPEP2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Dipeptidase 2 (DPEP2)
hzH878Hu 人硫酸肝素-6-O-磺基转移酶1(HS6ST1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Heparan Sulfate-6-O-Sulfotransferase 1 (HS6ST1)
hzH877Hu 人硫酸肝素-6-O-磺基转移酶2(HS6ST2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Heparan Sulfate-6-O-Sulfotransferase 2 (HS6ST2)
hzH876Hu 人硫酸肝素-6-O-磺基转移酶3(HS6ST3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Heparan Sulfate-6-O-Sulfotransferase 3 (HS6ST3)
hzK169Hu 人C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(C1QTNF3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for C1q And Tumor Necrosis Factor Related Protein 3 (C1QTNF3)
hzJ051Hu 人鸟嘌呤脱氨酶(GDA)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Guanine Deaminase (GDA)
hzH881Hu 人无翅型MMTV整合位点家族成员10A(WNT10A)检测试剂盒人硫酸肝素-2-O-磺基转移酶1(HS2ST1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Heparan Sulfate-2-O-Sulfotransferase 1 (HS2ST1)