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(1)人磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽(PIK3Cδ)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽(PIK3Cδ)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽(PIK3Cδ)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽(PIK3Cδ)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzJ341Hu 人Cornulin蛋白(CRNN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cornulin (CRNN)
hzJ355Hu 人冠蛋白1A(CORO1A)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Coronin 1A (CORO1A) d
hzJ541Hu 人Necdin蛋白(NDN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Necdin (NDN)
hzJ554Hu 人桥连整合因子2(BIN2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Bridging Integrator 2 (BIN2)
hzJ555Hu 人桥连整合因子1(BIN1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Bridging Integrator 1 (BIN1)
hzJ596Hu 人Artemin蛋白(ARTN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Artemin (ARTN)
hzJ640Hu 人苯胺素(ANLN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Anillin (ANLN)
hzJ645Hu 人釉原蛋白X-连锁(AMELX)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Amelogenin, X-Linked (AMELX)
hzJ696Hu 人Abl交互子1(ABI1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Abl Interactor 1 (ABI1)
hzK459Hu 人脱中胚蛋白(EOMES)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Eomesodermin (EOMES)
hzK477Hu 人跨膜蛋白27(TMEM27)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Transmembrane Protein 27 (TMEM27)
hzA047Bo 牛肝细胞生长因子(HGF)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF)
hzA981Hu 人烟碱型胆碱受体α1(CHRNα1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cholinergic ReHZptor, Nicotinic, Alpha 1 (CHRNa1)
hzN826Hu 人丝氨酸/苏氨酸激酶39(STK39)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Serine/Threonine Kinase 39 (STK39)
hzJ161Hu 人弹性蛋白微原纤维界面因子2(EMILIN2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Elastin Microfibril InterfaHZ Located Protein 2 (EMILIN2)
hzG609Hu 人类固醇硫酸酯酶同工酶S(STS)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Steroid Sulfatase Isozyme S (STS)
hzC113Hu 人生长分化因子11(GDF11)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 11 (GDF11)
hzF025Hu 人磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽(PIK3Cδ)检测试剂盒人真核翻译延伸因子1γ(EEF1γ)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Eukaryotic Translation Elongation Factor 1 Gamma (EEF1g)
hzC109Hu 人生长分化因子3(GDF3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3)
hzC071Hu 人干扰素诱导T-细胞α亚族趋化剂(ITαC)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interferon Inducible T-HZll Alpha Chemoattractant (ITaC)
hzQ870Hu 人含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Zinc Finger, BED Type Containing Protein 3 (ZBED3)
hzD387Hu 人白细胞弹性蛋白酶抑制因子(LEI)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Leukocyte Elastase Inhibitor (LEI)
hzL060Hu 人帕金森氏病蛋白2(PARK2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Parkinson Disease Protein 2 (PARK2)