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人脯氨酸/精氨酸丰富端亮氨酸丰富重复蛋白(PRELP)ELISA试剂盒临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的人脯氨酸/精氨酸丰富端亮氨酸丰富重复蛋白(PRELP)ELISA试剂盒包含以下各组分:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)酶联物(结合物)及标本的稀释液;
(6)洗涤液;
(7)酶反应终止液。
人脯氨酸/精氨酸丰富端亮氨酸丰富重复蛋白(PRELP)ELISA试剂盒可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂:(1)固相的抗菌素原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);(2)酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate);(3)酶反应的底物。
人脯氨酸/精氨酸丰富端亮氨酸丰富重复蛋白(PRELP)ELISA试剂盒温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的生成可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成最多的沉淀。但因所需时间太长,在人脯氨酸/精氨酸丰富端亮氨酸丰富重复蛋白(PRELP)ELISA试剂盒中一般不予采用。
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