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铜-ATP酶(Cu-ATPase)测试盒实验步骤
HRP的制备
铜-ATP酶(Cu-ATPase)测试盒水提取:称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在绞肉机中绞碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次,合并2次滤液,测得总体积。
铜-ATP酶(Cu-ATPase)测试盒硫酸铵分级分离:在不断搅拌下,每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度,0℃),大约在1~2h内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面混浊液以3 000r/min离心15min,弃沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天,直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析,中间更换2~3次,用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并,在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min,弃去沉淀,量上清液的体积。
铜-ATP酶(Cu-ATPase)测试盒丙酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
铜-ATP酶(Cu-ATPase)测试盒精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L硫酸锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L,5 000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米黄色纤维状松软物,HRP产品的RZ值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。
hz-E11228 中文名称:人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA试剂盒 英文名称:Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11229 中文名称:人孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒 英文名称:Human orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11230 中文名称:人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒 英文名称:Human Stromelysin-1,ST1 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11231 中文名称:人基质裂解素(ST2)ELISA试剂盒 英文名称:Human Stromelysin-2,ST2 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11232 中文名称:人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒 英文名称:Human Stromelysin-3,ST3 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11233 中文名称:人脂氧素A4(LXA4)ELISA试剂盒 英文名称:Human Lipoxin A4,LXA4 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11234 中文名称:人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体(PR3-ANCA)ELISA试剂盒 英文名称:Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody,PR3-ANCA ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11235 中文名称:人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒 英文名称:Human β-lipotropic hormone,β-LPH ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11236 中文名称:人脂磷壁酸(LTA)ELISA试剂盒 英文名称:Human lipoteichoic acids,LTA ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11237 中文名称:人乙胺碘呋酮(AD)ELISA试剂盒 英文名称:Human amiodarone,AD ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11238 中文名称:人唾液酸(SA)ELISA试剂盒 英文名称:Human Sialic acid,SA ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11239 中文名称:人鞘磷脂(SM)ELISA试剂盒 英文名称:Human sphingomyelin,SM ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11240 中文名称:人尿游离皮质醇(UFC)ELISA试剂盒 英文名称:Human urinary free cortisol,UFC ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11241 中文名称:人硫酸软骨素(CS)ELISA试剂盒 英文名称:Human chondroitin sulfate,CS ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11242 中文名称:人硫酸皮肤素(DS)ELISA试剂盒 英文名称:Human dermatan sulfate,DS ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11243 中文名称:人硫酸类肝素(HS)ELISA试剂盒 英文名称:Human heparan sulfate,HS ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11244 中文名称:人硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒 英文名称:Human keRatan sulfate,KS ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11245 中文名称:人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒 英文名称:Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody,ASCA ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11246 中文名称:人迟现抗原4(VLA4)ELISA试剂盒 英文名称:Human very late appearing antigen 4,VLA4 ELISAkit 规格:48T/96T