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肝素溶液实验步骤
HRP的制备
肝素溶液水提取:称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在绞肉机中绞碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次,合并2次滤液,测得总体积。
肝素溶液硫酸铵分级分离:在不断搅拌下,每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度,0℃),大约在1~2h内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面混浊液以3 000r/min离心15min,弃沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天,直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析,中间更换2~3次,用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并,在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min,弃去沉淀,量上清液的体积。
肝素溶液丙酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
肝素溶液精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L硫酸锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L,5 000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米黄色纤维状松软物,HRP产品的RZ值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。
hz-E12587 中文名称:大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Anti-thyroid-globulin antibody,ATGA/TGAB ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12588 中文名称:大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒 英文名称:Rat corticotropin releasing hormone,CRH ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12589 中文名称:大鼠促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒 英文名称:Rat gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12590 中文名称:大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Leukotriene B4,LT-B4 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12591 中文名称:大鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 英文名称:Rat leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12592 中文名称:大鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Epidermal growth factor,EGF ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12593 中文名称:大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒 英文名称:Rat intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12594 中文名称:大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒 英文名称:Rat telomerase,TE ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12595 中文名称:大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒 英文名称:Rat matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12596 中文名称:大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒 英文名称:Rat matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12597 中文名称:大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒 英文名称:Rat matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12598 中文名称:大鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 英文名称:Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12599 中文名称:大鼠碱性成纤维生长因子(bFGF)ELISA试剂盒 英文名称:Rat basic fibroblast growth factor,bFGF ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12600 中文名称:大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒 英文名称:Rat macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12601 中文名称:大鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Soluble Intercellular Adhesion Molecule 1,sICAM-1 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12602 中文名称:大鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒 英文名称:Rat soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12603 中文名称:大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Immunoglobulin A,IgA ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12604 中文名称:大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Immunoglobulin E,IgE ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12605 中文名称:大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Immunoglobulin G,IgG ELISAkit 规格:48T/96T