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肝素抗凝管实验步骤
HRP的制备
肝素抗凝管水提取:称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在绞肉机中绞碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次,合并2次滤液,测得总体积。
肝素抗凝管硫酸铵分级分离:在不断搅拌下,每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度,0℃),大约在1~2h内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面混浊液以3 000r/min离心15min,弃沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天,直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析,中间更换2~3次,用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并,在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min,弃去沉淀,量上清液的体积。
肝素抗凝管丙酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
肝素抗凝管精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L硫酸锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L,5 000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米黄色纤维状松软物,HRP产品的RZ值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。
hz-E12606 中文名称:大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Immunoglobulin M,IgM ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12607 中文名称:大鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Endostatin,ES ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12608 中文名称:大鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒 英文名称:Rat brain natriuretic peptide,BNP ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12609 中文名称:大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Prostaglandin E2,PG-E2 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12610 中文名称:大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Neuron-specific enolase,NSE ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12611 中文名称:大鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒 英文名称:Rat intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12612 中文名称:大鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒 英文名称:Rat intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12613 中文名称:大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 英文名称:Rat plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12614 中文名称:大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒 英文名称:Rat plasminogen activator inhibitor,PAI ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12615 中文名称:大鼠血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12616 中文名称:大鼠血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒 英文名称:Rat thrombomodulin,TM ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12617 中文名称:大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒 英文名称:Rat platelet-derived growth factor,PDGF ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12618 中文名称:大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒 英文名称:Rat oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12619 中文名称:大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒 英文名称:Rat platelet activating factor,PAF ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12620 中文名称:大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA试剂盒 英文名称:Rat procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12621 中文名称:大鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12622 中文名称:大鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 英文名称:Rat C-Reactive Protein,CRP ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12623 中文名称:大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12624 中文名称:大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA) ELISA试剂盒 英文名称:Rat Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12625 中文名称:大鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Tissue factor,TF ELISAkit 规格:48T/96T