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植物样本提取液实验步骤
HRP的制备
植物样本提取液水提取:称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在绞肉机中绞碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次,合并2次滤液,测得总体积。
植物样本提取液硫酸铵分级分离:在不断搅拌下,每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度,0℃),大约在1~2h内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面混浊液以3 000r/min离心15min,弃沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天,直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析,中间更换2~3次,用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并,在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min,弃去沉淀,量上清液的体积。
植物样本提取液丙酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
植物样本提取液精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L硫酸锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L,5 000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米黄色纤维状松软物,HRP产品的RZ值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。
hz-E12666 中文名称:大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA试剂盒 英文名称:Rat matrix metalloproteinase 10,MMP-10 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12667 中文名称:大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒 英文名称:Rat matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12668 中文名称:大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒 英文名称:Rat matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12669 中文名称:大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒 英文名称:Rat matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12670 中文名称:大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒 英文名称:Rat matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12671 中文名称:大鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)ELISA试剂盒 英文名称:Rat matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase,MMP-8 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12672 中文名称:大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒 英文名称:Rat 5-Nucleotidase,5-NT ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12673 中文名称:大鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Osteoprotegerin,OPG ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12674 中文名称:大鼠B因子(BF)ELISA试剂盒 英文名称:Rat factor B,BF ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12675 中文名称:大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Oncostatin-M,OSM ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12676 中文名称:大鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒 英文名称:Rat placenta growth factor,PLGF ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12677 中文名称:大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒 英文名称:Rat regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12678 中文名称:大鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒 英文名称:Rat L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12679 中文名称:大鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12680 中文名称:大鼠可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Soluble Cluster of differentiation 40 ligand,sCD40L ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12681 中文名称:大鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12682 中文名称:大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E12683 中文名称:大鼠血管生成素受体Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA试剂盒 英文名称:Rat angiopoietin receptor Tie1,ANG-R-Tie1 ELISAkit 规格:48T/96T