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线粒体提取试剂盒实验步骤
HRP的制备
线粒体提取试剂盒水提取:称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在绞肉机中绞碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次,合并2次滤液,测得总体积。
线粒体提取试剂盒硫酸铵分级分离:在不断搅拌下,每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度,0℃),大约在1~2h内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面混浊液以3 000r/min离心15min,弃沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天,直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析,中间更换2~3次,用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并,在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min,弃去沉淀,量上清液的体积。
线粒体提取试剂盒丙酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
线粒体提取试剂盒精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L硫酸锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L,5 000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米黄色纤维状松软物,HRP产品的RZ值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。
HZA382Hu 中文名称:人蛋白激酶Bγ(PKBγ)ELISA试剂盒 英文名称:for Protein Kinase B Gamma (PKBg)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA383Hu 中文名称:人磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)ELISA试剂盒 英文名称:for Phosphoinositide-3-Kinase Class-2-Alpha Polypeptide (PIK3C2a)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA831Hu 中文名称:人凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)ELISA试剂盒 英文名称:for Thrombin/Antithrombin Complex (TAT)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA832Hu 中文名称:人纤溶酶/抗纤溶酶复合体(PAP)ELISA试剂盒 英文名称:for Plasmin/Antiplasmin Complex (PAP)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA833Hu 中文名称:人血管性血友病因子(vWF)ELISA试剂盒 英文名称:for Von Willebrand Factor (vWF)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA834Hu 中文名称:人凝血因子Ⅹ(F10)ELISA试剂盒 英文名称:for Coagulation Factor X (F10)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA840Hu 中文名称:人凝血因子Ⅸ(F9)ELISA试剂盒 英文名称:for Coagulation Factor IX (F9)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA842Hu 中文名称:人脂蛋白a(Lpa)ELISA试剂盒 英文名称:for Lipoprotein, a (Lpa)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA810Hu 中文名称:人心肌营养素1(CT1)ELISA试剂盒 英文名称:for Cardiotrophin 1 (CT1)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA384Hu 中文名称:人白介素23(IL23)ELISA试剂盒 英文名称:for Interleukin 23 (IL23)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA385Hu 中文名称:人白介素27(IL27)ELISA试剂盒 英文名称:for Interleukin 27 (IL27)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA901Hu 中文名称:人多巴胺受体D3(DRD3)ELISA试剂盒 英文名称:for Dopamine Receptor D3 (DRD3)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA848Hu 中文名称:人糖原磷酸化酶M(PYGM)ELISA试剂盒 英文名称:for Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA849Hu 中文名称:人糖原磷酸化酶L(PYGL)ELISA试剂盒 英文名称:for Glycogen Phosphorylase, Liver (PYGL)ELISAkit 规格:48T/96T
CEA882Hu 中文名称:人胃泌素抑制肽(GIP)ELISA试剂盒 英文名称:for Gastric Inhibitory Polypeptide (GIP)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA591Hu 中文名称:人抗增殖细胞核抗原(PCNA)ELISA试剂盒 英文名称:for ProlifeRating Cell Nuclear Antigen (PCNA)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA593Hu 中文名称:人肌原纤蛋白1(FBN1)ELISA试剂盒 英文名称:for Fibrillin 1 (FBN1)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA391Hu 中文名称:人卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒 英文名称:for Follistatin (FS)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA387Hu 中文名称:人补体3a(C3a)ELISA试剂盒 英文名称:for Complement Component 3a (C3a)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA388Hu 中文名称:人补体成分5a(C5a)ELISA试剂盒 英文名称:for Complement Component 5a (C5a)ELISAkit 规格:48T/96T