经典法无内毒素质粒DNAout本实验方法的基本原理是，在高盐状态下，硅胶膜专一性地吸附DNA；而在低盐或水溶液状态下，DNA被洗脱下来。此法简便快捷，可在30分钟内同时提纯二十多个样品。从3～5ml培养过夜的含高拷贝质粒的菌液中可以获得10～20μg高纯度的质粒DNA，用于酶切、转化、DNA自动测序和手工测序等。

经典法无内毒素质粒DNAout是一种使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母细胞壁，然后采用一种新型的酵母质粒纯化柱实现从酵母细胞中进行小量质粒快速抽提的试剂盒。

1无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需约1-1.5小时即可完成。

2试剂盒提供了破壁酶(Lyticase)，酵母收集后，加入Lyticase消化去除细胞壁，接着采用传3统碱裂法裂解细胞，然后将获得的上清液转移至结合柱结合DNA，经过离心快速洗涤，最后用洗脱液洗脱出酵母质粒DNA。

4由于采用了高浓度的破壁酶，无需再使用玻璃珠，可以避免因为玻璃珠的机械作用带来的酵母基因组DNA污染。

经典法无内毒素质粒DNAout纯化柱可以结合的质粒量的上限约为20微克。质粒DNA的产量依赖于酵母携带质粒的拷贝数，酵母菌株以及生长条件。通常酵母质粒的拷贝数较低，1.5-5ml培养过夜的酵母抽提获得的质粒DNA量约为1-3微克左右。高拷贝酵母质粒抽提时的得率会大大提高。抽提所得质粒的量与酵母培养浓度、质粒拷贝数、酵母品系等因素有关。

使用本试剂盒抽提得到的酵母质粒DNA可用于各种常规分子生物学实验，如转化、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切、测序、文库筛选等。

经典法无内毒素质粒DNAout相关产品如下：

90801A-20 一站式AT克隆试剂盒 

90801B-20 一站式AT克隆试剂盒 

60609-200 T4 DNA连接酶 

70602-30 DNA快速连接试剂盒 

51101-20 克必隆常态转化液 

50901-50 菌落PCR试剂盒2.0 

100103A-20 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 

100103B-20 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 

81109A-20 酵母化学感受态细胞制备试剂盒 

81109B-20 酵母化学感受态细胞制备试剂盒 

81201-20 酵母电转感受态细胞制备试剂盒 

100884-2.5 IPTG干粉 

80909-1.5 IPTG溶液 

100885-500 X-Gal干粉 

80910-10 X-Gal溶液 

100207-100 干粉型LB培养基 

100820-100 干粉型LB-Lennox培养基 

100820-250 干粉型LB-Lennox培养基 

100821-250 干粉型2×YT培养基 

100822-250 干粉型SB培养基 

100823-250 干粉型SOC培养基 

100824-250 干粉型TB培养基 

100825-250 干粉型自诱导培养基 

100826-10 穿刺培养基 

100827-10 菌种保存液 

60404-100 超级培养基

70803-100 单菌落筛选试剂盒