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癌胚抗原放免试剂盒操作说明书
CEA(HY-014) RIA KIT
临床意义:
人体消化系统的癌胚抗原(CEA),分子量约为150,000-200,000的糖蛋白。CEA是一种结肠癌的相关抗原。测定血液中CEA水平可用作癌症病人的监测,确定治疗效果好坏。肿瘤术后或者药疗之后,血液中CEA水平将下降。手术成功,CEA将持续下降直至正常水平。如手术失败,或癌症复发,CEA血清水平将再次回升到不正常水平。药盒利用均相竟争抑制原理,采用非平衡法对病人血清、血浆、胸水、腹水以及其它体液进行直接测定。
药盒组成:
1、 标准6瓶,浓度为0、5、10、20、40、80ng/ml。
2、 125I-CEA 1瓶。
3、 CEA抗体1瓶。
4、分离剂(第二抗体)一瓶。
癌胚抗原放免试剂盒操作说明书样品处理:
取晨空腹静脉血,分离血清。2-8℃放置可保存一周,若冰冻保存,可放置四周。溶血
和脂血样品不能使用,混浊样品离心取上清,高浓度血清样品(CEA>80ng/ml),应先用生理盐
水稀释,计算结果时,要注意样品稀释倍数。胸、腹水、尿液可直接测定。
操作方法:
试管编号,按下表程序操作。
操作表 ( 单位: ul)
管 别 | 标准品 | 样品 | 抗血清 | 蒸馏水 | 混匀,37℃温育2小时。 | 125I-CEA | 混匀,4℃过夜,任取三管测总T(CPM) | 分离剂 |
NSB管 | 100(S0) | -- | -- | 100 | 100 | 1000 | ||
S0管 | 100 | -- | 100 | -- | 100 | 1000 | ||
S1-S末管 | 100 | -- | 100 | -- | 100 | 1000 | ||
样品管 | -- | 100 | 100 | -- | 100 | 1000 | ||
血清NSB管* | 100* | -- | -- | 100 | 100 | 1000 |
*--用新鲜人血清。
混匀,室温放置15分钟,离心(3500转/分)15分钟,吸弃上清液,测定各管沉淀的放射性计数(CPM)。
癌胚抗原放免试剂盒操作说明书数据处理:
1、 计算机处理:建议函数模型采用三次多项式或log~logit法。
2、 计算、绘图法:
计算各管的百分率:以S0(cpm数)为B0,各标准管Si(cpm数)为Bi,求各管的百分结合率。
Bi Bi管(cpm)—NSB管(cpm)
— %= —————————————— ×100
B0 B0管(cpm)—NSB管(cpm)
(1)线性回归:用logX~logitY回归,求出r、a、b值,样品含量可由下式计算得出。
- a + logit Y
Log X= ————
b
(2)绘图法:用各标准点计算的结果,在log~logit坐标纸上绘制标准曲线图,未知样品浓度可根据Bi/B0的百分结合率从标准曲线图上查出。
正常叁考值:
各实验室应建立自己的正常值。下面正常值仅供参考。
CEA<15ng/mL(15цg/L),阳性值>20ng/mL(20цg/L)。
癌胚抗原放免试剂盒操作说明书技术特性:
1、曲线范围:(5~80)ng/ml(5~80цg/L)。
2、灵敏度: < 2ng/ml(2цg/L)。
3、特异性:CEA抗血清与AFP交叉反应合格。
4、精密度:(X=30.2ng/mL)批内CVw<4%,批间CVb<6% .
保存及有效期:
药盒于(2~8)℃避光保存,切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。
药盒参考数据:
指标 | B/T(%) | Bi/B0(%) | ||
项目 | NSB | S0 | S1 | S末 |
参数 |
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