猪精子蛋白17(Sp17)Elisa试剂盒实验流程：

注意：孵育时间和洗涤次数请严格按照说明书执行，不得随意更改。

放大液要使用之前现配先用，不得预先配置，洗涤效果对结果至关重要。

1. 取出板子，安排样品，标准品排布顺序。

2. 用400ul1×洗液洗涤ELISA板子两次，每次10—15s(小心不得抓板孔表面，洗涤间歇不得过大，不能使板孔晾干)。

猪精子蛋白17(Sp17)Elisa试剂盒按下图稀释标准品(在培养板中稀释)。

4. 加100ul样品稀释液至H1，H2孔中。

猪精子蛋白17(Sp17)Elisa试剂盒加50ul 样品稀释液到样品孔中，加50ul样品到样品孔中。

6. 准备生物化抗体（检测抗体），所有孔中各加50ul，封板室温（18-25摄氏度）震荡(100rpm/min)孵育2h。

7. 准备抗生物素的HRP，弃掉板子中液体，并用洗液洗涤3次。

8. 向所有孔中个加100ul稀释好的HRP，封板室温（18-25摄氏度）震荡(100rpm/min)孵育1h。

9. 弃掉板子中液体，并用洗液洗涤3次，向所有孔中个加100ulTMB底物。封板室温（18-25摄氏度）孵育10-20min，每孔加100ul终止液。

10. 450nm读板。

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