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猪视黄醇结合蛋白4(RBP4)Elisa试剂盒实验流程:
注意:孵育时间和洗涤次数请严格按照说明书执行,不得随意更改。
放大液要使用之前现配先用,不得预先配置,洗涤效果对结果至关重要。
1. 取出板子,安排样品,标准品排布顺序。
2. 用400ul1×洗液洗涤ELISA板子两次,每次10—15s(小心不得抓板孔表面,洗涤间歇不得过大,不能使板孔晾干)。
猪视黄醇结合蛋白4(RBP4)Elisa试剂盒按下图稀释标准品(在培养板中稀释)。
4. 加100ul样品稀释液至H1,H2孔中。
猪视黄醇结合蛋白4(RBP4)Elisa试剂盒加50ul 样品稀释液到样品孔中,加50ul样品到样品孔中。
6. 准备生物化抗体(检测抗体),所有孔中各加50ul,封板室温(18-25摄氏度)震荡(100rpm/min)孵育2h。
7. 准备抗生物素的HRP,弃掉板子中液体,并用洗液洗涤3次。
8. 向所有孔中个加100ul稀释好的HRP,封板室温(18-25摄氏度)震荡(100rpm/min)孵育1h。
9. 弃掉板子中液体,并用洗液洗涤3次,向所有孔中个加100ulTMB底物。封板室温(18-25摄氏度)孵育10-20min,每孔加100ul终止液。
10. 450nm读板。
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