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游离甲状腺素放免试剂盒说明书
FT4 (HY-10005) RIA KIT
临床意义:
人体中甲状腺合成和分泌的T3、T4是控制人体代谢的主要内分泌素,在血液循环中绝大部分T3、T4是以结合状态存在的,只有极少部分T3、T4以游离状态存在,但真正能够发挥生物活性的是游离部分(游离T3占总T3的0.3%,游离T4占总T4的0.03%左右),测定游离部分更能反映甲状腺功能状态的真正水平。总T3、T4的测定,由于易受血液中甲状腺结合球蛋白TBG等蛋白浓度变化影响,故测定结果不很可靠(例如:因妊娠、新生儿、遗传性TBG增高或减少),使总T3、总T4产生相应改变,而造成误诊。
本药盒应用碘标T4-X为示踪剂,建立了直接测定血清中FT4浓度的方法,具有特异性高、准确度高、灵敏度高等特点,是目前测定FT4较为理想的方法。
测定原理:
本药盒应用放射免疫分析方法进行测定。在均相竞争抑制反应中采用平衡法,用合成的T4衍生物为示踪剂,对病人血清样品进行直接测定。主要特点是在免疫反应中,不与TBG结合,又具有与T4抗原相同的抗原性。当被测物中FT4的浓度高时,剩余的抗血清结合位就少,从而与抗血清结合的示踪剂就少,反之结合就多。利用免疫分离剂分离出抗原—抗血清复合物,并测定复合物中的放射性计数。125I-FT4的结合量与样品中FT4的浓度呈函数关系,通过数据处理可求出样品中FT4的含量。
游离甲状腺素放免试剂盒说明书药盒组成及配制:
1、FT4标准品8瓶。使用时每瓶用0.5ml蒸馏水(或生理盐水)溶解,其中A点2瓶。
单位 | A | B | C | D | E | F | G |
ng/Dl | 0 | 0.0699 | 0.218 | 0.637 | 1.445 | 2.797 | 7.071 |
pg/Ml | 0 | 0.699 | 2.18 | 6.37 | 14.45 | 27.97 | 70.71 |
Pmol/L | 0 | 0.9 | 2.8 | 8.2 | 18.6 | 36 | 91 |
2、FT4抗血清(蓝色) 1 瓶。
3、125I-FT4(红色) 1瓶。
4、免疫分离剂 1瓶。
以上各组试剂均应在使用前配制且摇匀。
操作方法:
1、 样品采集:取晨空腹静脉血,分离血清,放置(2~8)℃可保存一周。若需放置较长时间,应在-25℃保存。脂血样品影响测定结果。
2、 实验方法:试管编号,按下表程序操作:
操作表 单位:цL
管别 | 标准品 | 样品 | 125I-FT4 | 蒸馏水 | 抗血清 | 混匀,37℃温育(1.5~2)小时,任取三管测总T(CPM)。 | 分离剂 |
NSB管 | 50(A) | —— | 100 | 100 | —— | 500 | |
S0管 | 50(A) | —— | 100 | —— | 100 | 500 | |
S1-S末管 | 50 | —— | 100 | —— | 100 | 500 | |
样品管 | —— | 50 | 100 | —— | 100 | 500 |
混匀,4℃放置15分钟,离心(3500转/分)15分钟,吸弃上清液,测定各管沉淀的放射性计数(CPM)。
游离甲状腺素放免试剂盒说明书数据处理:
1、 计算机处理:建议函数模型采用三次多项式或log~logit法。
2、 计算、绘图法:
计算各管的百分率:以S0(cpm数)为B0,各标准管Si(cpm数)为Bi,求各管的百分结合。
(1) 线性回归:用logX~logitY回归,求出r、a、b值,样品含量可由下式计算得出。
(2)绘图法:用各标准点计算的结果,在log~logit坐标纸上绘制标准曲线图,未知样品浓度可根据Bi/B0的百分结合率从标准曲线图上查出。
正常叁考值:
FT4:单位 ng/dL: 1.34±0.32 (0.71~1.99)
单位pg/mL: 13.44±3.19 (7.14~19.9)
单位 pmol/L:17.25±4.10(9.19~25.60)
技术特性:
1、曲线范围:(0.83~87.0)pg/mL [(1.07~112.0)pmol/L]
2、灵敏度: <0.12pg/mL (0.15pmol/L)
3、特异性: FT4抗血清与T3的交叉反应<5×10 - 6
4、精密度:批内变异CVw<4.5%,批间变异CVb<9.8%
5、单位换算:(pmol/L)=(pg/mL)×1.287
保存及有效期:
药盒于(2~8)℃避光保存,切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。
注意事项:
1、 有试剂包括待测样品应事先在室温下平衡20分钟。
2、 标准品溶解后在(2~8)℃保存,可稳定35天,不要反复冻融。
3、 免疫分离剂宜在(2~8)℃保存,不可冰冻。使用前应充分摇匀。
4、 不同批试剂不能混合使用,每份样品都应做双管实验。
5、 本实验使用放射性核素125I(剂量为0.2 цCi/mL),故应注意放射防护,放射性废物须按放射防护条例规定处理。
药盒参考数据:
指标 | B/T(%) | Bi/B0(%) | ||
项目 | NSB | S0 | S1 | S末 |
参数 | ≤5 | ≥60 | 80 | 10 |
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