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CA-125免疫放射试剂盒操作说明书
CA-125(HY-10019) IRMA KIT
一、测定原理及临床意义
CA-125是卵巢癌细胞相关的糖蛋白,分子量为200~1000KD,文献表明绝大部分卵巢癌患者血清中的CA-125水平明显升高,而大部分其他疾病患者或健康人血清中的CA-125水平保持正常。本试剂盒测定人血清中CA-125的水平,可用于卵巢癌的诊断,对手术、放疗或化疗后的疗效判断、病人随访及预报复发等具有重要意义。CA-125也可用于肺癌、输卵管癌病诊断的辅助指标。
本试剂盒采用试管包被抗CA-125单克隆抗体,它与抗原和125I标记的CA-125单克隆抗体反应成夹心的复合物。测定时将待测血清或标准血清和标记物(125I抗- CA-125抗体)加入抗体包被管中温育,然后弃上清,测量试管的放射性,标准或样品中的CA-125浓度和度管的放射性强度呈正相关,用各种不同浓度的CA-125做标准,就可获得标准曲线,从标准曲线上可查出被测血清中的CA-125含量。
二、药盒组成:
1、125 I-CA125 一瓶。(红色溶液)
1、 包被珠(使用前用纸吸干水分后再加入试管中)
2、 质控血清 2 瓶 (溶液) 含低、高两个剂量
4、CA-125标准品六瓶:0、20、40、100、200、500 U/ml。
CA-125免疫放射试剂盒操作说明书三、操作方法:
1. 标本的采集和处理:
(1) 待检者须空腹,静脉取血即可;
(2) 血样要及时分离血清,血清可在4℃保存2天或在 -20℃贮存2个月,应避免反复冻融。
2. 检测方法:将圆底聚苯乙烯编号(按复管操作),按以下表程序操作。
CA-125 IRMA 操作程序 (单位:ul)
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试 剂 T 标准管 样 品
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包 被 管 1粒 1粒 1粒
标 准 品 —— 100 ——
样 品 —— —— 100
125I- CA125 100 100 100
包被珠 1粒 1粒 1粒
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振荡摇匀,室温过夜或连续振荡2小时
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注:先吸去反应液,用蒸馏水或去离子水洗3—5次,每次约1ml 最后一次一定要将水吸干。
将反应珠在吸水纸上吸干水分后转入干净测量管中,用γ计数器测各珠1分钟的放射性计数(CPM值)。
CA-125免疫放射试剂盒操作说明书四、结果计算:
所有CPM值均需先减去S0的CPM值后再参加运算。
1、 选择γ计数器上的免疫放射程序,进行以下参数设置:
(1) S0,S1-S5,样品等管号;
(2) 结合率方式选择B;
(3) 曲线拟合方式选择:Log—Log处理;
(4) 标准浓度的设置及输入;
(5) 测定时间设置:60秒。
2、 也可以用计算器(CASIOfx—3600p, CASIOfx—1800p)的MODE 2 Log— Log 程序。
3、 还可以用手工作图:双对数直角坐标作图(横坐标为浓度,纵坐标为CPM值)
五、正常参考值:
各试验室应根据本实验室条件及接触人群的不同,做出自己的正常值。
下列正常值仅供参考:< 35 U /ml
六、质量参数
1、灵敏度:<10U/ml
2、特异性:与CA153、CA50、CA199、CEA等的交叉反应<5.1%。
3、精密度:批内:CV<10% 批间:<15%
4、标记物总放射性活度:50T:111 kBq/瓶,100T :222 kBq/瓶
七、注意事项:
1、使用本药盒的实验室应具有“放射性同位素使用许可证”,使用过程中产生的放射性废物应
按国家有关规定处理。
2、本药盒贮存于2~8℃,不同批号的试剂不能混用,同一批号的试剂可混匀后使用。
3、各试剂临用时先恢复至室温,必须摇匀后使用。
4、样品4℃保存2天,-20℃保存2个月,应避免反复冻融。
5、选择适当直径的试管,使反应液浸没珠子。
6、如样品血清浓度大于500 U/ml,应用生理盐水稀释后再检测。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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